[发明专利]一种酵母菌落PCR菌体前处理的方法无效
| 申请号： | 201210106892.4 | 申请日： | 2012-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN103374604A | 公开（公告）日： | 2013-10-30 |
| 发明（设计）人： | 赵宗保;林心萍;张素芳;朱志伟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12R1/645;C12R1/865 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酵母菌落PCR菌体前处理的方法。该方法为：菌体经过灭活，两步酶解，最后煮沸的处理后，上清可直接用于PCR反应。本方法制备的样品可有效地扩增基因组上单拷贝、长片段基因。此方法为大规模的酵母筛选和鉴定提供了新的途径。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 酵母 菌落 pcr 菌体 处理 方法 | ||
【主权项】：
一种酵母菌落PCR菌体前处理的方法，其特征在于：首先将酵母菌体悬浮于溶液中作为样品，灭活处理，再先后加入不同的两种酶处理，最后将样品溶液煮沸，取上清直接作为PCR反应的模板；先加入的所述酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、β‑1，3‑甘露聚糖酶、β‑葡聚糖酶、α‑1，4‑葡聚糖酶中的一种；酶处理条件为温度25℃～55℃，时间5min～2h，酶用量0.01U/107个细胞～5U/107个细胞；后加入的所述酶为蛋白酶、蛋白酶K、磷脂酶、蜗牛酶、几丁质酶中的一种；酶处理条件为温度25℃～55℃，时间5min～2h，酶用量0.1U/107个细胞～4U/107个细胞。
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