[发明专利]一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针定量检测microRNA的分析方法有效
| 申请号： | 201210107456.9 | 申请日： | 2012-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN102719526A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 叶邦策;尹斌成;刘玉强 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人： | 邬震中 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针定量检测microRNA的分析方法。该方法是，设计一条含有三种功能序列的DNA扩增模板：与靶标microRNA结合序列，nicking核酸内切酶酶切序列和合成荧光纳米簇的DNA互补序列。当靶标microRNA与DNA扩增模板结合后，诱导恒温扩增反应和nicking核酸内切酶特异性的酶切反应，得到大量单链DNA产物，其中合成荧光纳米银簇的DNA序列与硝酸银溶液在硼氢化钠的还原作用下制备荧光纳米银簇探针，测定反应体系的荧光信号并计算荧光改变值，与标准工作曲线比对，推算出靶标microRNA的浓度。该方法具有灵敏度高、特异性强、线性检测范围宽、背景信号低、操作简单等特点，可广泛应用于组织，血液或细胞的生物样本中microRNA检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 恒温 扩增 反应 合成 荧光 纳米 探针 定量 检测 microrna 分析 方法 | ||
【主权项】：
一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针检测microRNA的分析方法，其特征在于，利用靶标microRNA与DNA扩增模板结合后，诱导恒温扩增反应和nicking核酸内切酶特异性的酶切反应得到大量单链DNA产物，该单链DNA产物与加入的硝酸银溶液在硼氢化钠还原作用下制备荧光纳米银簇探针，测定反应体系中的荧光信号并计算荧光信号改变值，与标准工作曲线比对，推算出靶标microRNA的浓度。
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