[发明专利]肝实质细胞及其制备、鉴定与应用方法有效
| 申请号： | 201210107490.6 | 申请日： | 2012-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN103374546B | 公开（公告）日： | 2018-05-18 |
| 发明（设计）人： | 邓宏魁;赵东昕;陈松 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;A61L27/38;C12Q1/02;C12Q1/6881;C12Q1/04;G01N33/68 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 张国梁 |
| 地址： | 100871*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肝实质细胞及其制备、鉴定与应用方法。本发明提供制备肝实质细胞的方法，包括如下步骤：1)将多潜能干细胞培养获得内胚层细胞；2)将获自步骤1)的内胚层细胞培养获得原始肠管细胞；3)将获自步骤2)的原始肠管细胞培养获得成肝细胞；其特征在于：将获自步骤2)的细胞进行传代，并转入到在含有成纤维细胞生长因子(FGF)和骨形态形成蛋白(BMP)的肝细胞诱导培养基I中培养，获得成肝细胞；4)将获自步骤3)的成肝细胞培养获得成熟的肝实质细胞。本发明还涉及根据所述方法制备的肝实质细胞。本发明制备的肝实质细胞较以往具有更高的代谢活性，制备效率高，应用前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 实质 细胞 及其 制备 鉴定 应用 方法 | ||
【主权项】：
1.制备肝实质细胞的方法，包括如下步骤：1)将多潜能干细胞培养获得内胚层细胞；2)将获自步骤1)的内胚层细胞转入到原始肠管诱导培养基中进行培养，获得原始肠管细胞；3)将获自步骤2)的细胞进行传代，并转入到在含有成纤维细胞生长因子-7，骨成型蛋白-2和骨成型蛋白-4的肝细胞诱导培养基I中培养，检测所获得的细胞的PROX1和HNF6的表达，获得表达PROX1和HNF6的成肝细胞；4)将获自步骤3)的成肝细胞培养获得成熟的肝实质细胞，其中所述多潜能干细胞为诱导多能性干细胞，即iPS细胞，或下述任一种NIH编号的细胞系的细胞：BG01,BG02,BG03,BG04，SA01,SA02,SA03，ES01,ES02,ES03,ES04,ES05,ES06，TE03,TE32,TE33,TE04,TE06,TE62,TE07,TE72，UC01,UC06，WA01,WA07,WA09,WA13和WA14。
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