[发明专利]一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用有效
申请号: | 201210110348.7 | 申请日: | 2012-04-16 |
公开(公告)号: | CN103374541A | 公开(公告)日: | 2013-10-30 |
发明(设计)人: | 何璟;王珊 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/76;C12P21/02;C12R1/465 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070 *** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用,其步骤:A、StreptomycessahachiroiATCC33158中aziD2基因缺失突变株构建:将用于缺失aziD2基因的重组质粒导入到野生型菌株,获得aziD2基因缺失突变菌株,其总DNA能扩增出1.0kb的特征带;B、aziD2基因表达质粒的构建:aziD2基因表达质粒的构建是基于链霉菌表达质粒进行,用XbaI+SpeI酶切处理aziD2基因片段后,以正确的方向插入到载体组成型强启动子PermE*下游的XbaI位点上,获得aziD2基因的表达质粒;C、aziD2基因互补表达菌株的构建:通过接合转移的方法将aziD2基因表达质粒导入到aziD2基因缺失的菌株中,以互补菌株的总DNA为模板,扩增出1.1kb的特征带,得到互补aziD2基因的菌株WSD2CP。方法易行,操作简便,增强该基因的表达量,从而提高了阿嗪霉素B的产量。 | ||
搜索关键词: | 一种 霉素 基因工程 wsd2cp 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种阿嗪霉素的基因工程菌WSD2CP,其特征在于:Streptomyces sahachiroi菌株WSD2CP,CCTCC,CCTCC M2012098。
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