[发明专利]重组轮状病毒VP6载体蛋白及其制备

摘要

本发明提供一种重组轮状病毒VP6载体蛋白及其制备，重组轮状病毒VP6载体蛋白编码基因上有下列六个供外源抗原表位基因插入的限制性内切酶位点，不影响VP6蛋白原有的分子结构，保留了VP6蛋白原有所有抗原表位，并都位于蛋白分子的表面，可最大限度的展示外源抗原表位免疫学性质，以便将其他病毒的抗原表位插入本发明的重组轮状病毒VP6载体蛋白中，从而构建出轮状病毒RV与其他病毒联合重组的嵌合疫苗及试剂。

主权项

一种重组轮状病毒VP6载体蛋白，其特征在于重组轮状病毒VP6载体蛋白编码基因上有下列六个供外源抗原表位基因插入的限制性内切酶位点：Sac I（gagctc），BspT104 I（ttcgaa），Kpn I（ggtacc），Bln I（cctagg），Sac II（ccgcgg），Xho I（ctcgag），其中：重组轮状病毒VP6载体蛋白编码基因的核苷酸序列如下：   1 atggatgttt tgtattcatt atcaaaaact cttaaggatg ctagagacaa  51 aattgtcgaa ggcactttat actctaatgt tagtgatcta attcaacaat 101 ttaatcaaat gataattact atgaatggaa atgaatttca aactggagga 151 attggtaatc taccaaccag aaattggagt tttgattttg gtttacttgg 201 aactacgctt ttgaatttag atgccaatta tgttgaaact gcgcgtaaca 251 caattgatta ttttgttgat tttgtagata acgtatgtat ggatgagatg 301 gttagagaat cacaaagaaa cggaattgca ccgcagtcag aatcacttag 351 aaaactatca gggattaagt ttaaaagaat aaattttgac aattcgtcgg 401 aatacataga aaactggaac ttgcaaaata gaagacaaag aactggtttt 451 acatttcata aaccaaacat ctttccatat tcagcttcat ttacgttaaa 501 tagatcacaa cctgcgcatg agctcatggg tacaatgtgg ttgaatgcag 551 gttcagagat tcaagttgct ggatttgatt attcgaacat acagcaattt 601 gagcatatag ttcagctccg tagggtgtta acgacggcta caataactct 651 tttaccagat gctgaaaggt ttagtttccc tagagtaatt aattcagctg 701 atggtaccac atggtatttt aatccagtaa tacttagacc gaataatgtc 751 gaagtagaat ttctattgaa tggacagata ataaatactt atcaggcacc 801 taggtttggt acaattgtag ctagaaattt tgatactatt agattatcat 851 ttcaattgat gagaccgcgg accccatcag tcgcagcact cgagcatcat 901 gctactgtag gactaacatt acgcattgaa tctgcaattt gtgagtcagt 951 gcttgctgat gctagtgaaa caatgttagc taatgtaaca tctgttagac1001 aagaatatgc aataccagtt gggccagttt ttccaccagg tatgaattgg1051 actgatttga ttactaacta ctcaccatct agagaggata atttacaacg1101 tgtgtttaca gtagcttcca ttagaagcat gcttgttaaa tgataa重组轮状病毒VP6载体蛋白由380个氨基酸组成，其氨基酸序列如下：Met Asp Val Leu Tyr Ser Leu Ser Lys Thr Leu Lys Asp Ala Arg Asp Lys Ile Val Glu Gly Thr Leu Tyr Ser Asn Val Ser Asp Leu Ile Gln Gln Phe Asn Gln Met Ile Ile Thr Met Asn Gly Asn Glu Phe Gln Thr Gly Gly Ile Gly Asn Leu Pro Thr Arg Asn Trp Ser Phe Asp Phe Gly Leu Leu Gly Thr Thr Leu Leu Asn Leu Asp Ala Asn Tyr Val Glu Thr Ala Arg Asn Thr Ile Asp Tyr Phe Val Asp Phe Val Asp Asn Val Cys Met Asp Glu Met Val Arg Glu Ser Gln Arg Asn Gly Ile Ala Pro Gln Ser Glu Ser Leu Arg Lys Leu Ser Gly Ile Lys Phe Lys Arg Ile Asn Phe Asp Asn Ser Ser Glu Tyr Ile Glu Asn Trp Asn Leu Gln Asn Arg Arg Gln Arg Thr Gly Phe Thr Phe His Lys Pro Asn Ile Phe Pro Tyr Ser Ala Ser Phe Thr Leu Asn Arg Ser Gln Pro Ala His Glu Leu Met Gly Thr Met Trp Leu Asn Ala Gly Ser Glu Ile Gln Val Ala Gly Phe Asp Tyr Ser Asn Ile Gln Gln Phe Glu His Ile Val Gln Leu Arg Arg Val Leu Thr Thr Ala Thr Ile Thr Leu Leu Pro Asp Ala Glu Arg Phe Ser Phe Pro Arg Val Ile Asn Ser Ala Asp Gly Thr Thr Trp Tyr Phe Asn Pro Val Ile Leu Arg Pro Asn Asn Val Glu Val Glu Phe Leu Leu Asn Gly Gln Ile Ile Asn Thr Tyr Gln Ala Pro Arg Phe Gly Thr Ile Val Ala Arg Asn Phe Asp Thr Ile Arg Leu Ser Phe Gln Leu Met Arg Pro Arg Thr Pro Ser Val Ala Ala Leu Glu His His Ala Thr Val Gly Leu Thr Leu Arg Ile Glu Ser Ala Ile Cys Glu Ser Val Leu Ala Asp Ala Ser Glu Thr Met Leu Ala Asn Val Thr Ser Val Arg Gln Glu Tyr Ala Ile Pro Val Gly Pro Val Phe Pro Pro Gly Met Asn Trp Thr Asp Leu Ile Thr Asn Tyr Ser Pro Ser Arg Glu Asp Asn Leu Gln Arg Val Phe Thr Val Ala Ser Ile Arg Ser Met Leu Val Lys。