[发明专利]一种观赏鱼用红酵母微生态制剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种观赏鱼用红酵母微生态制剂的制备方法，该方法包括从斑马鱼的肠道中部分离出红酵母、通过生理生化实验和聚合酶链式反应PCR扩增及序列分析对红酵母进行鉴定与对红酵母微生态制剂进行制备。该方法不仅工艺流程操作简便，成本低廉，而且本方法制备的观赏鱼的养殖用红酵母微生态制剂可以起到有效预防观赏鱼和水产品的疾病，增强抗病力的作用，降低病死率，同时不会造成环境污染和抗生素药物残留的问题。

主权项

一种观赏鱼用红酵母微生态制剂的制备方法，该制备方法包括红酵母的分离、红酵母的鉴定及红酵母微生态制剂的制备；其特征是：无菌操作对斑马鱼的体表用 75%的酒精消毒，取其肠道中部，置于盛有10mL 的无菌生理盐水的离心管中，剪碎混匀，取适量均匀涂布于马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基上，保持培养基内的温度为恒温25‑28℃，培养3天；挑选典型菌落转种到新的马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基上，反复传代2～3 次，筛选出目的酵母接种到斜面备用；所述的马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基的成分及制备方法为: 去皮马铃薯190‑210g，葡萄糖 18‑20g及琼脂 13.5‑16.5g，由去离子水定容至990‑1010 mL， PH值为7‑8，115‑126℃条件下灭菌18‑22min；红酵母的鉴定包括生理生化实验及26S rDNA 的聚合酶链式反应PCR扩增及序列分析；红酵母微生态制剂的制备方法包括菌株提取、菌株活化、菌株扩培及菌株收集浓缩。