[发明专利]建鲤GAPDH基因含内含子的部分序列的克隆方法及其realtimePCR方法有效
申请号: | 201210120450.5 | 申请日: | 2012-04-23 |
公开(公告)号: | CN102643799A | 公开(公告)日: | 2012-08-22 |
发明(设计)人: | 唐永凯;李建林;俞菊华;李红霞;董在杰 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/11 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李纪昌 |
地址: | 214081 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明通过克隆建鲤GAPDH含内含子的部分序列,然后设计跨越内含子的引物,优化扩增反应条件,来消除DNA的污染,从而提高扩增效率。这样,可为GAPDH作为内参基因,在利用realtimePCR对建鲤功能基因的研究中提供有用的方法。 | ||
搜索关键词: | 建鲤 gapdh 基因 内含 部分 序列 克隆 方法 及其 realtimepcr | ||
【主权项】:
一种建鲤GAPDH基因含内含子的部分序列的克隆方法,按照以下步骤实现:建鲤血液基因组DNA提取,设计引物、PCR扩增,产物纯化,转入载体,蓝白斑筛选,质粒测序,其特征在于:所设计的引物序列为:正向:CCGTTCATGCTATCACAGCTACACA反向:GGAAGCAGGATCTTACCATGTGAC用此方法克隆所得建鲤GAPDH基因含内含子的部分序列为如SEQ ID中No.1所述。
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