[发明专利]基于磁珠法从植物叶片中提取基因组DNA的试剂盒及其提取方法

摘要

本发明属于分子生物学技术领域，尤其涉及基于磁珠法从植物叶片中提取基因组DNA的试剂盒及其提取方法，基于磁珠法从植物叶片中提取基因组DNA的试剂盒，其包括：预处理溶液，快速裂解液，DNA结合液、磁珠悬浮液和洗脱液，通过预处理溶液可以有效的破解细胞壁和细胞膜，通过预处理溶液可以有效的去除多糖、多酚、单宁等杂质对于基因组DNA提取的干扰。快速裂解液以盐酸胍和Tween 20为主要成分，常温条件下能够在2min内充分裂解植物细胞，并且后续的离心步骤只要2min即可，大大节约了操作时间。盐酸胍为强变性剂，其裂解细胞的效果好，而且，本发明中不需要加入有机溶剂氯仿等，不会对操作人员产生危害，安全可靠。

主权项

基于磁珠法从植物叶片中提取基因组DNA的试剂盒，其包括：预处理溶液，快速裂解液，DNA结合液、磁珠悬浮液和洗脱液，预处理溶液：0.05M～0.2M Tris‑Hcl、0.01～0.05M EDTA(乙二胺四乙酸)、1％～3％巯基乙醇、0.5％～2％PVP(聚乙烯吡咯烷酮)，快速裂解液：50～100mmol/L KAC(醋酸钾)，PH＝5.2、10～50mmol/LEDTA(乙二胺四乙酸)、4～6M GHCL(盐酸胍)、5～25mM sodium citrate(柠檬酸钠)、1％～5％Tween 20(聚氧乙烯去水山梨醇单月桂酸酯)，DNA结合液：5％～10％PEG8000(聚乙二醇8000)、1.5‑4M GITC(异硫氰酸胍)，0.5‑1M NaCl，磁珠悬浮液：磁珠溶于超纯水中，其中磁珠的浓度为50‑100mg/mL，洗脱液：1～10mM Tris‑HCl、1‑2mM EDTA(乙二胺四乙酸)，pH＝8.0。