[发明专利]一种从湖泊沉积物样品中提取纯化总DNA的高效方法无效

专利信息
申请号: 201210137580.X 申请日: 2012-04-23
公开(公告)号: CN103374566A 公开(公告)日: 2013-10-30
发明(设计)人: 赵吉;李靖宇 申请(专利权)人: 内蒙古大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 010021 内蒙古*** 国省代码: 内蒙古;15
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了从湖泊沉积物中快速提取总DNA的高效方法,包括以下步骤:(1)取0.3g-1.0g左右样品于装有若干颗2.5mm灭菌玻璃珠的2mL的离心管中,加入300-1000μL DNA提取缓冲液,再加入50-500μL重铬酸钾溶液,使用Vortex-2(Mobio Laboratories Inc)涡旋10s-1min,加入50-300μL SDS溶液,涡旋3min,65℃温育5-60min(2)加入50-200μL氯化钾溶液,上下剧烈颠倒混匀数次。本方法可快速高效提取沉积物土壤总DNA,同时满足去腐除臭的特殊效果,解决了富营养化水体沉积物提取DNA的技术难点,为土壤、淤泥、沉积物、污泥等环境样品宏基因组研究和各类基因扩增提供高纯度的DNA供试样品。
搜索关键词: 一种 湖泊 沉积物 样品 提取 纯化 dna 高效 方法
【主权项】:
1.一种沉积物环境样品总DNA快速提取方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取0.3g-1.0g左右沉积物土样于装有三颗2.5mm灭菌玻璃珠的2mL的离心管中,300-1000μLDNA提取缓冲液(100mmol/L Tris-HCl,1.5mol/L NaCl,1%CTAB,pH 8.0),再加入50-500μL重铬酸钾溶液(0.05mol/L-3mol/L),使用Vortex-2(Mobio Laboratories Inc)涡旋10s-1min,加入50-300μLSDS溶液(5%-20%),涡旋3min,65℃温育5-60min;(2)加入50-200μL氯化钾溶液(0.05mol/L-5mol/L),上下剧烈颠倒混匀数次,12000r/min离心2min;(3)取上清1000μL于2mL离心管中,加入等体积的酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1),12000r/min离心5min;(4)取上清900μL于1.5mL离心管中,加入0.6倍体积的异丙醇,冰浴10min,12000r/min离心5min;(5)弃上清,用70%的酒精洗沉淀,自然干燥或冷冻干燥;(6)50μLTE溶解沉淀。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于内蒙古大学,未经内蒙古大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201210137580.X/,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top