[发明专利]诱导性表达多能性维持基因的有蹄类动物细胞系及其构建无效
| 申请号： | 201210140857.4 | 申请日： | 2012-05-08 |
| 公开（公告）号： | CN103388008A | 公开（公告）日： | 2013-11-13 |
| 发明（设计）人： | 吴璐 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;C12N15/873 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及诱导性表达多能性维持基因的有蹄类动物细胞系及其构建。本发明建立了利用可诱导系统(tet-on)表达维持多能性关键基因oct4的有蹄类动物成纤维细胞系，该细胞系具有病毒拷贝数低，oct4表达上调明显，细胞单细胞来源纯度高的特点。利用该细胞系作为核移植的供体细胞，用药物强力霉素诱导oct4的表达，可帮助核移植后卵细胞的重编程，以最终达到建立有蹄类动物胚胎干细胞的目的，进行各种转基因动物的育种。 | ||
| 搜索关键词： | 诱导性 表达 多能 维持 基因 有蹄类 动物 细胞系 及其 构建 | ||
【主权项】：
一种在有蹄类动物成纤维细胞中表达oct4基因的方法，其特征在于，包括：(1)提供慢病毒质粒1，其中含有以下操作性连接的元件：ef1α，rtta，IRES，EGFP；以及慢病毒质粒2，其中含有以下操作性连接的元件：ef1α，EGFP，TRE，Oct4；(2)将慢病毒质粒1和慢病毒质粒2共同转染有蹄类动物成纤维细胞，选择EGFP阳性的细胞，该细胞是能表达oct4基因的有蹄类动物成纤维细胞。
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