[发明专利]一种采用自克隆工程菌高效发酵生产L-山梨糖的方法有效
| 申请号： | 201210145148.5 | 申请日： | 2012-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN102660599A | 公开（公告）日： | 2012-09-12 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;周景文;王小北;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P19/02 | 分类号： | C12P19/02;C12N15/53;C12N1/21;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀丽 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种采用自克隆工程菌高效发酵生产L-山梨糖的方法，属于采用代谢工程调控策略优化发酵过程技术领域。本发明采用代谢工程的手段，获得自克隆氧化葡萄糖酸杆菌工程菌，以其为生产菌株，通过发酵工艺优化使山梨醇脱氢酶的活性提高了1.33倍；(2)以山梨醇为唯一碳源，发酵36h后，L-山梨糖产量达到225g/L，与出发菌株节相比将发酵时间缩短了12h。本发明通过调控山梨醇脱氢途径，成功实现了山梨醇快速化地导向目标代谢产物山梨糖的目的。为今后利用代谢工程手段改造菌株促进目标产物过量积累提供了一定的借鉴意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 采用 克隆 工程 高效 发酵 生产 山梨 方法 | ||
【主权项】：
一种采用自克隆工程菌高效发酵生产L‑山梨糖的方法，其特征在于以氧化葡萄糖酸杆菌工程菌为生产菌株，接种到种子培养基中，500mL摇瓶装液50mL，于30°C、200rpm条件下培养20‑24h；按15%的接种量将培养好的种子接入发酵培养基，30°C，200rpm条件下培养36h；所述氧化葡萄糖酸杆菌工程菌过量表达外源山梨醇脱氢酶基因，其构建方法为：通过化学全合成方法获得Genbank:NC_006677.1所示山梨醇脱氢酶基因，克隆到表达载体pBBR1MCS‑2，进一步转化氧化葡萄糖酸杆菌获得自克隆基因工程菌。
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