[发明专利]一个海带雌配子体特异性分子标记FSML-1488的染色体定位有效
| 申请号： | 201210146700.2 | 申请日： | 2012-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN102660648A | 公开（公告）日： | 2012-09-12 |
| 发明（设计）人： | 周志刚;刘宇;谷俊刚;毕燕会 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 金重庆 |
| 地址： | 201306 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一个海带雌配子体特异性分子标记FSML-1488的染色体定位方法，包括以下步骤：（1）带有目标片段FSML-1488质粒DNA的制备；（2）海带配子体染色体的制备；（3）探针的制备；（4）荧光原位杂交。本发明优点在于：本发明利用各种工具酶，如离析酶、鲍鱼酶、纤维素酶、果胶酶等的优化配合以获得海带孢子体和配子体原生质体的基础上，制备高质量的染色体，突破FISH技术在藻类学研究中的技术“瓶颈”，成功地将一个长为1488bp的海带雌配子体特异性FSML-1488分子标记定位在染色体上。 | ||
| 搜索关键词： | 一个 海带 配子体 特异性 分子 标记 fsml 1488 染色体 定位 | ||
【主权项】：
一个海带雌配子体特异性分子标记FSML‑1488的染色体定位方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）带有目标片段FSML‑1488质粒DNA的制备：通过CTAB法提取海带配子体DNA后，利用PCR技术扩增到长为1488 bp的雌配子体特异性FSML‑1488的片段，然后TA克隆后转化至大肠杆菌中，最后提取质粒获得目标片段质粒DNA，所述的目标片段FSML‑1488的序列为SEQ ID NO.5；（2）海带配子体染色体的制备：利用混合酶液，即纤维素酶、果胶酶、离析酶及鲍鱼酶，处理海带配子体细胞，以DAPI染色，获得分裂相比较好的高质量染色体；（3）探针的制备：对提取的质粒获得目标片段FSML‑1488质粒DNA利用切口平法进行绿色生物素标记探针；（4）荧光原位杂交：按照荧光原位杂交的常规方法进行雌配子体特异性FSML‑1488分子标记的染色体定位。
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