[发明专利]一种泰乐菌素基因工程菌及其应用无效
| 申请号： | 201210179669.2 | 申请日： | 2012-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN102690775A | 公开（公告）日： | 2012-09-26 |
| 发明（设计）人： | 王义;任勇;刘建成;王文超;徐淑芬 | 申请（专利权）人： | 宁夏泰瑞制药股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/76;C12P19/62;C12R1/54 |
| 代理公司： | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人： | 叶学军 |
| 地址： | 750101 宁夏*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种泰乐菌素基因工程菌，其构建方法为：通过PCR克隆泰乐菌素合成关键限速酶基因TylF及透明颤菌血红蛋白VHb基因，利用大肠杆菌-链霉菌穿梭表达载体构建重组质粒，将重组质粒导入大肠杆菌ET12567/pUZ8002中，将大肠杆菌ET12567/pUZ8002与弗氏链霉菌孢子进行结合转移培养，转化链霉菌，然后通过安普霉素抗性筛选转化子，用PCR进一步确定转化子，最终获得基因工程菌。本发明构建的泰乐菌素基因工程菌可以直接用于泰乐菌素工业化生产，与当前工业生产中所用的泰乐菌素菌种相比能够显著提高泰乐菌素产量使其达到17000～18000u/ml，有效的提高泰乐菌素A组分的含量使其达到94～95％。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 菌素 基因工程 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种泰乐菌素基因工程菌，其构建方法为：通过PCR克隆泰乐菌素合成关键限速酶基因TylF及透明颤菌血红蛋白VHb基因，利用大肠杆菌‑链霉菌穿梭表达载体构建重组质粒，将重组质粒导入大肠杆菌ET12567/pUZ8002中，将大肠杆菌ET12567/pUZ8002与弗氏链霉菌孢子进行结合转移培养，转化链霉菌，然后通过安普霉素抗性筛选转化子，用PCR进一步确定转化子，最终获得基因工程菌。
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