[发明专利]定量检测大肠杆菌RNA的方法及其专用标准品和应用有效
| 申请号： | 201210202181.7 | 申请日： | 2012-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN102936619A | 公开（公告）日： | 2013-02-20 |
| 发明（设计）人： | 何苗;林怡雯;李丹;吴舒旭 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/10;C12Q1/06;C12N15/11;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100084 北京市海*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种定量检测大肠杆菌RNA的方法及其专用标准品和应用。本发明提供的方法包括如下步骤：（1）按照如下方法制作标准曲线；将RNA标准品配制成各个浓度的标准品稀释液，然后将各个标准品稀释液反转录为cDNA，以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR，以实时荧光定量PCR体系中的cDNA对应的RNA拷贝数（也可对拷贝数进行数据处理，如拷贝数以10为底的对数）和Ct值制作标准曲线方程；（2）提取大肠杆菌的总RNA并反转录为cDNA，以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR，将Ct值代入所述标准曲线方程，得到大肠杆菌的RNA含量。本发明的方法可用于快速检测环境中少量的大肠杆菌，为快速检测活性大肠杆菌提供技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 定量 检测 大肠杆菌 rna 方法 及其 专用 标准 应用 | ||
【主权项】：
一种定量检测大肠杆菌RNA的方法，包括如下步骤：（1）按照如下方法制作标准曲线；将RNA标准品配制成各个浓度的标准品稀释液，然后将各个标准品稀释液反转录为cDNA，以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR，以实时荧光定量PCR体系中的cDNA对应的RNA拷贝数和Ct值制作标准曲线方程；（2）提取大肠杆菌的总RNA并反转录为cDNA，以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR，将Ct值代入所述标准曲线方程，得到大肠杆菌的RNA含量。
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