[发明专利]一种体外生产牦牛胚胎的方法有效
| 申请号： | 201210206870.5 | 申请日： | 2012-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN102703378A | 公开（公告）日： | 2012-10-03 |
| 发明（设计）人： | 郭宪;阎萍;丁学智;裴杰;包鹏甲;梁春年;褚敏;朱新书 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 730050 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种体外生产牦牛胚胎的方法，由下述时间点控制：卵巢保存时间0-3h，卵母细胞成熟时间27-28h，成熟卵母细胞体外受精时间16-18h，受精卵培养时间144-168h。并提供了牦牛卵母细胞成熟液、卵母细胞体外受精液的基本组成，确保体外生产胚胎的质量和效率，防止卵母细胞不完全成熟或多精受精。该技术与方法全面，可完全应用于牦牛胚胎体外生产，能够有效提高牦牛的繁殖效率，保护牦牛种质资源。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 生产 牦牛 胚胎 方法 | ||
【主权项】：
一种体外生产牦牛胚胎的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将采集的牦牛卵巢0‑3h内用生理盐水30‑38℃带回实验室，用抽吸法获取卵母细胞置于保存液中；(2)将卵母细胞用成熟液洗涤3次，培养27‑28h；(3)牦牛冷冻精液用改良的BO液上浮法处理；(4)步骤(3)处理的精子移入受精液中，受精液中含步骤(2)处理的卵母细胞；(5)受精16‑18h后，用0.2％透明质酸酶溶解卵丘细胞1‑2min，然后Voatex漩涡震荡，脱除卵丘细胞；(6)将步骤(5)处理的受精卵移入颗粒细胞共培养体系中，每隔48h换1/2体积的培养液，培养144‑168h后收集牦牛胚胎。
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