[发明专利]一种快速高效测定葡萄酒中黄烷醇的方法

摘要

一种快速高效测定葡萄酒中黄烷醇的方法，属于葡萄酒风味物质分析技术领域。本发明具体为采用超高效液相色谱技术快速测定葡萄酒中5种黄烷醇，解决现有的黄烷醇测定方法存在检测时间长，前处理复杂等问题。本发明利用超高效液相色谱和BEHC18色谱柱，并对色谱分离条件进行优化，能够在10min内对葡萄酒中的5种黄烷醇物质进行分离和测定。本发明无需进行任何样品前处理，最大限度的减少样品在前处理过程中的损失，真实的反映样品中黄烷醇含量；并且分析过程快速，分离效果良好，大大提高了检测效率。

主权项

一种快速高效测定葡萄酒中黄烷醇的方法，其特征在于利用超高效液相色谱UPLC和二极管阵列检测器同时对葡萄酒中5种黄烷醇进行分离和测定；所述5种黄烷醇分别为：儿茶素、表儿茶素、表倍儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表倍儿茶素没食子酸酯；测定步骤为：（1）标准溶液配置：分别精确称取所述5种黄烷醇各2.3‑16.0mg，用甲醇溶解并转移至10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，封口，作为标准贮备液，在‑20℃保存备用；使用前，根据实验需要将此标准贮备液用甲醇稀释至适宜含量，以配制标准工作液和混合标准工作液；（2）葡萄酒样品进样前过0.45µm滤膜；（3）超高效液相色谱分离检测条件：所述超高效液相色谱分析是指通过流动相梯度洗脱，进行紫外波长检测，洗脱和检测条件为：色谱柱：美国Bridge Ethylene Hybrid (BEH) C18色谱柱或同类UPLC反相C18色谱柱；流动相：流动相A为2%的乙酸水，流动相B为甲醇；洗脱程序：0‑5.5 min，流动相A为92％‑75％，流动相B为8％‑25％；5.5‑6.5 min，流动相A为75％‑60％，流动相B为25％‑40％；6.5‑8.6 min，流动相A为60％‑92％，流动相B为40％‑8％；8.6‑10 min，流动相A为92％，流动相B为8％；流速设定：0.3 mL/min；紫外检测波长：280 nm；柱温30 ℃，进样量为1 μL，以峰面积外标法定量；紫外检测选用二极管阵列检测器；（4）定性：对所述5种黄烷醇混合标准品进行色谱检测，得到5种黄烷醇标准品色谱图；对葡萄酒样品进行色谱检测，得到葡萄酒样品中5种黄烷醇的UPLC色谱图；通过比较进行定性分折；（5）制作标准曲线，定量：制作标准曲线：准确配制0.23‑160 mg/L的五个不同浓度的5种黄烷醇的混合标样，按照上述液谱条件进样，进样量为1μL；以峰面积Y为纵坐标，质量浓度X为横坐标，计算得到5条标准曲线；定量：每种待测物质分别对应于外标做标准曲线，经过UPLC检测后将峰面积代入相对应的标准曲线方程计算出待测物质的含量。