[发明专利]一种分离和纯化人参皂苷Rb3的方法

摘要

本发明涉及中药生物活性成分的提取制备方法，具体涉及一种降血糖作用有效成分——人参皂苷Rb3的分离、纯化方法。本发明以人参茎叶总皂苷为原料，将其用甲醇与硅胶混溶后，水浴蒸干，制备成粉末状样品胶。利用干法上样，解决了人参茎叶总皂苷难溶解的问题。采用柱层析法分离、纯化制备出高纯度的人参皂苷Rb3。本发明具有制备工艺易于操作，收率高，不引入有毒物质，成本低廉等特点，产品可以用于治疗和预防糖尿病。对功能化人参皂苷的制备、开发的研究具有非常重要的意义。

主权项

一种人参皂苷Rb3的制备方法，其操作步骤包括：(1)样品胶的制备将人参茎叶总皂苷用甲醇溶解，加入总皂苷质量2倍的80～100目硅胶，水浴蒸干至粉末状，成为样品胶；(2)分离胶的制备取人参茎叶总皂苷质量20倍的300～400目硅胶，用二氯甲烷充分溶解，超声、搅拌，除气泡制得分离胶；(3)装柱干法上样，将步骤(2)获得的分离胶装入到底部有玻璃棉的玻璃柱内，再装入步骤(1)获得的样品胶，最后装入一层石英砂，备用；(4)洗脱分别以甲醇和二氯甲烷的体积比为1:4,3:7,2:3,1:1的混合液作为洗脱液，依次进行梯度洗脱，分别收集洗脱流份的同时，采用薄层色谱法检测，收集、合并与人参皂苷Rb3阳性对照品Rf值相同的流份溶液，用旋转蒸发仪旋干并保存；(5)人参皂苷Rb3的纯化步骤(4)获得的人参皂苷Rb3，用40%甲醇水溶液溶解后作为样品备用；称取总皂苷质量35倍的ODS硅胶作为分离胶，甲醇装柱；先加入两个柱体积的40%甲醇水溶液，再用滴管沿着柱内壁加入备用的样品；用甲醇与水体积比为2:3,9:11,11:9,13:7,3:1的混合溶剂依次进行梯度洗脱，采用薄层色谱法检测，收集、合并与人参皂苷Rb3阳性对照品Rf值相同的流份溶液，用旋转蒸发仪旋干并保存。