[发明专利]一种卵裂球单细胞的固定方法无效

专利信息
申请号: 201210221309.4 申请日: 2012-06-30
公开(公告)号: CN102706716A 公开(公告)日: 2012-10-03
发明(设计)人: 孙莹璞;李刚;戴善军;郭艺红;金海霞;辛志敏;宋文妍;石森林;彭兆锋 申请(专利权)人: 郑州大学第一附属医院
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28
代理公司: 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 代理人: 聂孟民
地址: 450052 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明涉及一种卵裂球单细胞的固定方法,可有效解决现有技术操作繁琐,要求条件苛刻,难以掌握,细胞固定效果差的问题。解决的技术方案是:将单个卵裂球在磷酸盐缓冲液中漂洗,移至载玻片的标定区域内,标定区域内滴加有1-2μL的吐温20和盐酸的混合溶液,将载玻片置于35-38℃的显微镜热台上,液体自然蒸发过程中观察细胞膨胀、破裂、核游离,若细胞膜未完全破裂,可重复滴加吐温20和盐酸的混合溶液;待观察到细胞膜破裂、细胞核游离后,停止滴加吐温20和盐酸的混合液,室温下干燥后,滴加甲醇和冰醋酸的混合液,除去残留的胞浆。本发明操作简单方便,容易掌握,细胞固定效果好,固定率高,简单高效,大大节省了人力和物力。
搜索关键词: 一种 卵裂 单细胞 固定 方法
【主权项】:
一种卵裂球单细胞的固定方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将单个卵裂球在磷酸盐缓冲液中漂洗,得漂洗的卵裂球细胞;(2)将步骤(1)所得卵裂球细胞移至载玻片的标定区域内,标定区域内滴加有1‑2μL的吐温20和盐酸的混合溶液,将载玻片置于35‑38℃的显微镜热台上,液体自然蒸发过程中观察细胞膨胀、细胞膜破裂、细胞核游离,若细胞膜未完全破裂,可重复滴加吐温20和盐酸的混合溶液;(3)待在显微镜下观察到步骤(2)中细胞的细胞膜破裂、细胞核游离后,停止滴加吐温20和盐酸的混合溶液,室温15‑30℃下干燥后,再在载玻片上滴加甲醇和冰醋酸的混合溶液,除去残留的胞浆。
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