[发明专利]一种固定化酶法连续转化生产γ-氨基丁酸的方法无效
| 申请号： | 201210233749.1 | 申请日： | 2012-07-06 |
| 公开（公告）号： | CN102719500A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 高智慧;任丽梅;余琼林;刘磊;王文芳;丁国钰 | 申请（专利权）人： | 天津启仁医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12N15/60;C12N15/70;C12N9/88;C12N11/12 |
| 代理公司： | 天津佳盟知识产权代理有限公司 12002 | 代理人： | 侯力 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新区开发区海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 一种采用固定化酶连续转化生产γ-氨基丁酸的方法。采用构建的谷氨酸脱羧酶基因工程菌BL21(DE3)-pET35b-GAD，将其诱导表达后破碎细胞，收集上清液，对融合表达纤维素结合域（CBD）的谷氨酸脱羧酶的最适反应条件和固定化条件进行了研究。利用CBD标签对纤维素的特异性吸附性能，将纤维素载体加入到细胞裂解液中，实现谷氨酸脱羧酶的特异性吸附，并采用交联剂交联固定化谷氨酸脱羧酶。优化转化条件，最佳的催化反应条件为，pH5.5；反应时间2h；底物L-谷氨酸钠的浓度40g/L；固定化酶浓度8mL/L；辅酶磷酸吡哆醛浓度0.1mM。在最适反应条件下，重复连续转化10次，底物L-谷氨酸钠的转化率均达到93%以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 固定 化酶法 连续 转化 生产 氨基 丁酸 方法 | ||
【主权项】：
一种采用固定化酶法连续转化生产γ‑氨基丁酸的方法，其特征在于该方法包括：以固定化重组表达的纤维素结合域‑谷氨酸脱羧酶融合蛋白、简称“固定化酶”为酶源，浓度为0.05mM~0.15mM的磷酸吡哆醛存在的条件下，进行酶促反应，反应过程中，向反应体系中加入固定化酶4mL/L至20mL/L，底物L‑谷氨酸钠或L‑谷氨酸为20g/L至50g/L，温度25至50℃，pH值为4至6，经酶法转化反应1h至4h生产γ‑氨基丁酸，并进一步分离获得γ‑氨基丁酸粉末或晶体。
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