[发明专利]肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体融合蛋白及其制备方法

摘要

本发明提供一种肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体胞外部分与XVIII型胶原蛋白NC1域或三聚域的融合蛋白，肽接头为[GlyGlyGlyGlySer]n，n为0-4的整数。通过构建重组融合蛋白基因；表达融合蛋白基因并进行复性。其中复性后的融合蛋白表现出较强的诱导肿瘤细胞凋亡活性。本发明利用XVIII型胶原蛋白NC1域融合TRAIL这一融合基因的设计，可延长相应融合蛋白在实验动物体内半衰期，克服TRAIL半衰期仅几分钟的缺点；NC1或三聚域具有极强的三聚特性，融合TRAIL后能稳定其三聚体，从而保持诱导肿瘤细胞凋亡活性；NC1域所含的内皮抑素域具有抑制新生血管生成的作用，此作用可与TRAIL的凋亡作用协同，增强融合蛋白的抗肿瘤效果。本发明方法可有效降低实验室或工业上生产融合蛋白的成本。

主权项

一种肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体与XVIII型胶原蛋白NC1域或三聚域的融合蛋白，该融合蛋白特征为：含有肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体TRAIL氨基酸序列114‑281部分、肽接头和XVIII型胶原蛋白NC1域或三聚域，其中所述的肽接头长0‑20个氨基酸，该肽接头存在于人TRAIL和人NC1或TD之间，且所述肽接头的氨基酸选自甘氨酸、丝氨酸，所述肽接头为 [GlyGlyGlyGlySer]n ，n为0‑4的整数。