[发明专利]一种用固定化磷脂酶C脱胶的方法

摘要

本发明提供一种用固定化磷脂酶C（PLC）对大豆毛油脱胶的方法。由于游离磷脂酶C能特异性水解磷酸基与甘油基之间的磷氧键，生成甘油二酯，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分，可以提高脱胶油的得率。但是由于自然酶混溶在反应体系中不仅不易分离回收，且成本高昂，难以反复或连续使用，因此，将固定化后的磷脂酶C添加到大豆毛油中，进行脱胶。对脱胶后磷含量、油脂得率及固定化磷脂酶C的重复使用次数的确定，得到脱胶后磷含量最低为3.8mg/kg，且油脂得率提高1.2倍，磷脂酶C连续使用6个批次后固定化酶相对活力仍保持在80％左右。因此，采用固定化后的磷脂酶C脱胶，既可提高精炼率，又可降低生产成本。

主权项

一种用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法，其特征在于用固定化磷脂酶C对大豆毛油脱胶的方法通过以下步骤实现：一、磷脂酶C的固定化：首先称取一定量的海藻酸钠于40℃水浴保温溶解；同时称取一定量的壳聚糖于5%的醋酸溶液中，40℃水浴保温溶解；再向溶解的壳聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl2溶液，混匀；称取一定量的磷脂酶C，加入到10 mL海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，静置一段时间，用灭菌后的注射器吸取混合液，以约5滴/s的速度注入壳聚糖醋酸溶液、CaCl2混合溶液中，以180 r/min转速搅拌，将其置于4℃环境固定化10 h；二、固定化酶脱胶：取水化大豆毛油300 g，预热至75℃，加入45%柠檬酸0. 6 mL混合搅拌维持30 min；冷却至温度为30~40℃左右，加入4mol/L NaOH溶液和一定量的蒸馏水混合均匀，然后取一定量的固定化磷脂酶加入大豆毛油中，60 r/min机械搅拌，在温度50℃下水浴反应一段时间；得到脱胶后的大豆毛油磷含量为3.8mg/kg，磷脂酶C脱胶后的油脂得率增长1.2倍；并确定了固定化磷脂酶C连续用于对大豆毛油的脱胶，使用6个批次后，测定固定化酶相对活力，结果酶活力仍保持在80％左右。