[发明专利]一种基于双酶偶联高通量检测微生物生产二元酸的新方法无效
| 申请号： | 201210255817.4 | 申请日： | 2012-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN103571915A | 公开（公告）日： | 2014-02-12 |
| 发明（设计）人： | 王钦宏;孙琳;涂然;齐显尼;姜丹;马延和 | 申请（专利权）人： | 天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/28 | 分类号： | C12Q1/28;C12Q1/26 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300308 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于双酶偶联反应的高通量检测微生物生产二元酸的新方法，具体涉及利用二元酸氧化酶和过氧化物酶偶联，在相应缓冲溶液中与二元酸的反应，产生荧光底物Resorufin。双酶偶联反应在96孔黑色微孔板中进行，利用酶标仪读取Ex/Em 490/585(nm)处的荧光值。二元酸与双酶偶联反应生成产物在Ex/Em 490/585(nm)处的荧光值与其浓度成线性关系，能够根据标准曲线计算浓度，并利用酶标仪和96孔黑色微孔板进行高通量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 双酶偶联高 通量 检测 微生物 生产 二元酸 新方法 | ||
【主权项】：
一种利用二元酸氧化酶和过氧化物酶偶联反应的检测微生物生产二元酸的高通量检测新方法，步骤如下：(1)将培养基活化菌群经稀释后涂布到固体培养基中，待单菌落长出后接种到96深孔培养板中培养；(2)将96深孔培养板利用冷冻离心机在合适的条件下离心，取其上清液进行测定；(3)利用双酶偶联的方法，在96孔黑色微孔板中结合试剂A测定上述上清液中二元酸含量；
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