[发明专利]影响奶牛乳腺炎易感/抗性HMGB3基因的核心启动子及其功能性分子标记与应用

摘要

本发明提供一种影响奶牛乳腺炎易感/抗性HMGB3基因的核心启动子及其功能性分子标记与应用，属于生物化学遗传育种技术领域，具体是通过反转录RT-PCR和实时荧光定量RT-qPCR的方法提供一个奶牛乳腺炎易感/抗性HMGB3候选基因，利用牛HMGB3基因P3启动子区的1个功能性SNP位点的信息，并且采用分子生物学相关技术鉴别奶牛在这个位点的基因型，选择具有乳腺炎抗性的基因型个体。选择有利的基因型个体留种，可以提高HMGB3基因抗性基因型在奶牛群体中的频率，从而提高群体抗奶牛乳腺炎的能力，降低奶牛乳腺炎的发病率，减少经济损失。本发明为奶牛的乳腺炎抗性遗传改良提供了一种新的方法。

主权项

一种改善种群奶牛的抗乳腺炎能力的方法，其特征在于：通过反转录RT‑PCR和实时荧光定量RT‑qPCR的方法提供一个奶牛乳腺炎易感/抗性HMGB3候选基因，同时为了深入研究HMGB3两个转录本的表达调控模式，利用在线软件分析发现牛HMGB3基因共有3个启动子区：P1、P2和P3，进一步通过构建载体、细胞转染、启动子活性测定和荧光强度测定实验发现了牛HMGB3基因3个启动子的核心区域，并且在第3个启动子P3的核心区域内发现了一个SNP，构建EGFP‑HMGB3‑P3载体，经293T细胞转染后，发现该SNP位点可影响启动子P3活性，属于功能性位点，利用该SNP与奶牛乳中体细胞评分SCS的关联分析表明该SNP与奶牛乳腺炎有关，选择有利的等位基因型个体留种，从而改善种群奶牛的抗乳腺炎能力。