[发明专利]无损检测细胞miRNA的表达量及确定细胞类型与状态的方法有效
| 申请号： | 201210258472.8 | 申请日： | 2012-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN103571929A | 公开（公告）日： | 2014-02-12 |
| 发明（设计）人： | 周琪;王秀杰;张映 | 申请（专利权）人： | 中国科学院动物研究所;中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 郭广迅 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种无损检测细胞miRNA的表达量及确定细胞类型与状态的方法，具体为利用细胞培养基中miRNA的表达量来判断细胞类型与状态的方法，包括培养不同类型的细胞，收集其培养基，提取培养基中的RNA，反转录，利用荧光定量PCR的方法检测细胞培养基中的miRNA，根据在对照不同细胞类型与状态下miRNA的表达量与所检到的miRNA表达量的关系来判断所检细胞的类型与状态。本发明的方法首次证明可通过检测培养基中miRNA的表达量判断细胞的类型与状态，包括干细胞的多能性水平和转分化获得的细胞状态等，从而避免对细胞的破坏，尤其适用于细胞数量有限的实验与临床方面的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 无损 检测 细胞 mirna 表达 确定 类型 状态 方法 | ||
【主权项】：
一种快速、简便、对细胞无损地检测细胞中miRNA的表达量和确定细胞类型与状态的方法，其是通过检测细胞培养基中的miRNA的表达量而实现的，所述培养基中miRNA表达量的检测通过包括以下步骤的方法进行：1）收集过夜培养细胞的培养基，离心，取上清，再将其过滤；2）用步骤1）获得的过滤后的上清液提取RNA；3）将步骤2）提取的RNA进行逆转录反应，得到cDNA溶液；4）将步骤3）得到的cDNA溶液进行PCR扩增反应，再用荧光定量PCR仪检测，从而得到其中miRNA的表达量。
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