[发明专利]可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体及其筛选方法和应用有效
申请号: | 201210259171.7 | 申请日: | 2012-07-25 |
公开(公告)号: | CN102766633A | 公开(公告)日: | 2012-11-07 |
发明(设计)人: | 王柯敏;郭秋平;刘小丹;羊小海;谭誉宇 | 申请(专利权)人: | 湖南大学 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 湖南兆弘专利事务所 43008 | 代理人: | 赵洪;杨斌 |
地址: | 410082 湖南省长沙市河西岳*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体,包括序列1~序列4中所示的DNA片段,还包括该核酸序列的一系列衍生物。本发明核酸适体的筛选方法包括以下步骤:首先合成随机单链DNA文库和引物,然后Cell-SELEX获得人肝癌细胞株Bel-7404特异核酸适体,PCR扩增文库,制备DNA单链文库,然后经过重复筛选、阴性筛选、多轮筛选等步骤后,得到可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体。本发明的核酸适体可在识别人肝癌细胞株Bel-7404或者制备检测人肝癌细胞株Bel-7404的试剂盒中应用,具有特异性强、无免疫原性、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。 | ||
搜索关键词: | 用于 检测 肝癌 细胞株 bel 7404 核酸 及其 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种可用于检测人肝癌细胞株Bel‑7404的核酸适体,所述核酸适体的核苷酸序列包括以下序列1~序列4中的任意一条序列所示的DNA片段:序列1:5’‑ATGAGAGCGTCGGTGTGGTATAAACGGTCACCCGAGTAGAGGGTATGGACTTCGACGTATGTAGGAGGGTGCGGAAGTA‑3’;序列2:5’‑ATGAGAGCGTCGGTGTGGTAATGGAATGTGGGAGGGGGACTCAGGACAGTCACGGGACATGTAGGAGGGTGCGGAAGTA‑3’;序列3:5’‑ATGAGAGCGTCGGTGTGGTAGAGGACCCCAGGGTATGGACTTCGACGTCTGAGGTCATCTGTAGGAGGGTGCGGAAGTA‑3’;序列4:5’‑ATGAGAGCGTCGGTGTGGTAAAGTTCAACAAGTGGGAGGGGGACTTAGGACAGTCATCTTGTAGGAGGGTGCGGAAGTA‑3’。
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