[发明专利]一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒有效
申请号: | 201210266240.7 | 申请日: | 2012-07-30 |
公开(公告)号: | CN102757960A | 公开(公告)日: | 2012-10-31 |
发明(设计)人: | 张红发;任婧 | 申请(专利权)人: | 光明乳业股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 朱水平;沈利 |
地址: | 201103 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒。半随机引物序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。半随机引物的序列如序列表中SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。包含该引物的PCR反应程序优选地包括:(1)95℃变性5分钟;(2)94℃变性30秒;(3)56℃退火30秒;(4)72℃延伸2分钟,步骤(2)~(3)重复30个循环;(5)72℃,延伸300秒;(6)产物于4℃保存。该半随机引物通用性强,特别适合未知基因序列的扩增,该PCR反应程序简单,扩增核酸目的序列特异性较强。 | ||
搜索关键词: | 一种 扩增 未知 序列 随机 pcr 技术 及其 引物 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种寡核苷酸,其特征在于,所述寡核苷酸序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。
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