[发明专利]一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒有效

专利信息
申请号: 201210266240.7 申请日: 2012-07-30
公开(公告)号: CN102757960A 公开(公告)日: 2012-10-31
发明(设计)人: 张红发;任婧 申请(专利权)人: 光明乳业股份有限公司
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/10
代理公司: 上海智信专利代理有限公司 31002 代理人: 朱水平;沈利
地址: 201103 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种扩增未知序列的半随机PCR技术及其引物和试剂盒。半随机引物序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。半随机引物的序列如序列表中SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。包含该引物的PCR反应程序优选地包括:(1)95℃变性5分钟;(2)94℃变性30秒;(3)56℃退火30秒;(4)72℃延伸2分钟,步骤(2)~(3)重复30个循环;(5)72℃,延伸300秒;(6)产物于4℃保存。该半随机引物通用性强,特别适合未知基因序列的扩增,该PCR反应程序简单,扩增核酸目的序列特异性较强。
搜索关键词: 一种 扩增 未知 序列 随机 pcr 技术 及其 引物 试剂盒
【主权项】:
一种寡核苷酸,其特征在于,所述寡核苷酸序列从5’端到3’端依次为:12~30个固定碱基,3~8个全简并的碱基N和3~7个固定碱基,其中所述N为:A或G或C或T。
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