[发明专利]一种用于检测猪Kobu病毒的检测试剂盒无效
申请号: | 201210271607.4 | 申请日: | 2012-08-02 |
公开(公告)号: | CN102925586A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 徐志文;李雪梅;朱玲;刘孟良;周远成 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学;四川川娇生态猪业股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 625014 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于检测猪Kobu病毒的检测试剂盒,检测50个样品的试剂盒组成如下:试剂A:TRIZOL 20ml、氯仿5ml、异丙醇12.5ml、75%乙醇10ml、RNasa-free水1ml;试剂B:5×PrimeScript Buffer 100μl、PrimeScript RT Enzyme Mix I 25μl、Oligo dT Primer 25μl、Random 6 mers 100μl、RNase Free dH2O 250μl;试剂C:上游引物P1 25μl、下游引物P2 25μl、SYBR Green I染料500μl、ddH2O 160μl;上游引物P1:5’-GGACCCAGACACTTACGAACA-3’;下游引物P2:5’-TCGGACCAGAATGGAAAGCA-3’。利用本试剂盒进行实时荧光定量PCR扩增曲线呈现出良好的S型,只出现扩增产物特异性的单个峰,产物的Tm值都在78-79℃之间,说明没有引物二聚体及非特异性扩增产物出现;检测的灵敏度可达10拷贝/微升,且具有很好的重复性。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 kobu 病毒 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种用于检测猪Kobu病毒的检测试剂盒,其特征在于,检测50个样品的试剂盒组成如下:试剂A:TRIZOL 20ml、氯仿5ml、异丙醇12.5ml、75%乙醇10ml、RNasa‑free水1ml;试剂B:5×PrimeScript Buffer 100μl、PrimeScript RT Enzyme Mix I 25μl、OligodT Primer 25μl、Random 6 mers 100μl、RNase Free dH2O 250μl;试剂C:上游引物P1 25μl、下游引物P2 25μl、SYBR Green I染料500μl、ddH2O 160μl;上游引物P1:5’‑GGACCCAGACACTTACGAACA‑3’;下游引物P2:5’‑TCGGACCAGAATGGAAAGCA‑3’。
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