[发明专利]用环介导等温扩增方法检测支气管败血波氏杆菌的试剂盒及其方法有效
| 申请号： | 201210271618.2 | 申请日： | 2012-08-02 |
| 公开（公告）号： | CN102925547A | 公开（公告）日： | 2013-02-13 |
| 发明（设计）人： | 徐志文;朱玲;张辉;杨宏伟;周远成 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学;四川太平洋生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 625014 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明与动物疫病分子生物学检测领域有关，具体涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测支气管败血波氏杆菌的检测试剂盒及其方法。本发明根据NCBI中Genbank数据库中发布的支气管败血波氏杆菌序列，经过序列比对，采用LAMP引物设计软件设计引物，运用环介导等温扩增技术进行支气管败血波氏杆菌的检测，具有快速、灵敏度高、特异性强、成本低等特点，可广泛应用于临床的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 用环介导 等温 扩增 方法 检测 支气管 败血 杆菌 试剂盒 及其 | ||
【主权项】：
一种用环介导等温扩增方法检测支气管败血波氏杆菌的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：环介导等温扩增反应液，23μL/份，其组成如下：1μL浓度为8U的BstDNA聚合酶，2.5μL的聚合酶缓冲液，浓度为5μmol/L的上游内引物FIP和下游内引物BIP各1μL，浓度为25μmol/L的上游外引物F3和下游外引物B3各1μL，2μL浓度为100mM的MgSO4，5μL浓度为10mM的dNTP，5μL浓度为5M的甜菜碱，3.5μL的无菌水；其中聚合酶缓冲液含有200mM Tris‑HCl(pH8.8)，100mM KCl，100mM(NH4)2SO4，20mM的MgSO4，1％Triton X‑100；所述的引物序列为：上游外引物F3：CCTTTGCCGCCAGATTCC下游外引物B3：GCTCCCAAGAGAGAAAGGC上游内引物FIP：TGGATTACGGCAGGTTTGCGA‑CCCGCACATTTCCGAACT下游内引物BIP：GGCAACAAAGGAAATCGCGGC‑TCTTCAAACCGGGCAGCT。
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