[发明专利]一种藏药组合物二十九味能消散及其制剂的质量检测方法

摘要

本发明公开了一种藏药组合物二十九味能消散及其制剂的质量检测方法，使用薄层色谱法对二十九味能消散中乳香、胡椒碱、肉豆蔻进行了定性鉴别，使用高效液相色谱法（HPLC法）对二十九味能消散中乌头碱、木香马兜铃酸进行了限度检查，同时采用高效液相色谱法（HPLC法）对二十九味能消散中芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、羟基红花黄色素A进行了定量检测。本发明方法建立了乳香、胡椒碱、肉豆蔻的薄层鉴别方法，乌头碱、木香马兜铃酸的限度检查方法，芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚、羟基红花黄色素A的含量测定方法，提高了产品质量标准，使该制剂在治疗疾病的同时，保证了用药的安全有效。

主权项

一种原料药组成为藏木香25重量份、寒水石（煅）125重量份、诃子75重量份、小米辣25重量份、碱花125重量份、肉豆蔻25重量份、荜茇25重量份、决明子25重量份、白豆蔻25重量份、骨碎补25重量份、胡椒25重量份、萝卜（炭）2重量份，草果25重量份、光明盐25重量份、阿魏2重量份、硇砂25重量份、山奈25重量份、贝齿（炭）25重量份、大黄100重量份、宽筋藤13重量份、红花25重量份、铁棒锤15重量份、石灰（制）25重量份、鹫粪(炒)40重量份、木香马兜铃25重量份、黄葵子25重量份、紫硇砂25重量份、乳香25重量份、渣驯膏25重量份的藏药组合物二十九味能消散及其制剂的质量检测方法，该方法包括如下鉴别和/或检查和/或含量测定方法中的一种或几种：鉴别：A.乳香的鉴别取藏药组合物二十九味能消散或其制剂粉末2~4g，加乙醚20~30ml，超声处理15min，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取乳香对照药材0.5g，加乙醚30ml，超声处理15min，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为8:1~2的二甲苯‑醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；喷以质量体积份数比1%香草醛硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.胡椒碱的鉴别取藏药组合物二十九味能消散或其制剂粉末2~4g，加醋酸乙酯20~30ml，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；取胡椒碱适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的对照品溶液；照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为3:1~3的环己烷‑醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.肉豆蔻的鉴别取藏药组合物二十九味能消散或其制剂粉末4~6g，置250ml圆底烧瓶中，加水100ml，煎煮1h，用挥发油测定器收集挥发油，挥发油测定器中开始加入少量水及1ml醋酸乙酯，煎煮完成后，收集醋酸乙酯部分，作为供试品溶液；取肉豆蔻1g，置100ml圆底烧瓶中，加水50ml，煎煮1h，用挥发油测定器收集挥发油，挥发油测定器中开始加入少量水及1ml醋酸乙酯，煎煮完成后，收集醋酸乙酯部分，作为对照药材溶液；照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为20:0.1~0.5的二甲苯‑醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷体积份数比为1%香草醛硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查：A.乌头碱的限度检查照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ D）测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比65~75:25~35:0.2:5的甲醇‑水‑三乙胺‑二氯甲烷为流动相；检测波长为235nm，理论板数按乌头碱峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备：取乌头碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取藏药组合物二十九味能消散或其制剂粉末10~15g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，加氨试液10ml，精密加入无水乙醇80～120ml，密塞，称定重量，冷浸1h后加热回流1h，放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液50ml，25℃~40℃减压回收溶剂至干，残渣精密加入稀盐酸溶液20ml溶解，冰浴中放置30min，滤过；用氨水调pH至10，将滤液转移至分液漏斗中，加乙酸乙酯萃取5次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，25℃~40℃减压回收溶剂至干，残渣精密加入甲醇2ml溶解，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10~20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明二十九味能消散或其制剂含铁棒锤以乌头碱（C34H47NO11）计，不得高于17μg/g；B.马兜铃酸A的限度检查照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥD）测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比60～70:30～40的甲醇‑体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为315nm；理论板数按木香马兜铃酸峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备：取马兜铃酸A对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取藏药组合物二十九味能消散或其制剂粉末6~10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇40~60ml，密塞，称定重量，超声20~40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，低温浓缩至干，残渣加体积份数比为0.5%氢氧化钠溶液20ml使其完全溶解并转移至分液漏斗中，用乙醚萃取2次，每次20ml，萃取后碱液使用质量分数3%盐酸调节pH至2‑3，用乙醚萃取5次，每次20ml合并乙醚萃取液，挥干，用甲醇溶解并转移至5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10~20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明二十九味能消散或其制剂含木香马兜铃以马兜铃酸A（C17H11NO7）计，不得高于30μg/g；含量测定：A.芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚的含量测定照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥD）测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比为80~90:10~20的甲醇‑体积份数比为0.1%的磷酸水溶液为流动相；检测波长为430nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备：精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄 酚对照品、大黄素甲醚对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品各80μg，大黄素甲醚40μg的溶液，分别精密量取上述对照品溶液各2ml，混匀，即得；即每1ml中含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16μg，含大黄素甲醚8μg；供试品溶液的制备：取藏药组合物二十九味能消散或其制剂粉末1~3g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇20~30ml，密塞，称定重量，超声20~40min，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加体积百分比为8%盐酸水溶液10ml，超声2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，放冷，置分液漏斗内，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，减压回收溶液至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5~10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明二十九味能消散或其制剂中芦荟大黄素（C15H10O5）、大黄酸（C15H8O6）、大黄素（C15H10O5）、大黄酚（C15H10O4）、大黄素甲醚（C16H12O5）总含量不得少于1.20mg/g；B.羟基红花黄色素A的含量测定照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥD）测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20～30:70～80的甲醇‑体积份数比为1%冰醋酸水溶液为流动相；检测波长为403nm；理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备：取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比为25%甲醇水溶液制成每1ml含50μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取藏药组合物二十九味能消散或其制剂粉末3~5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比为25%甲醇水溶液20~30ml，密塞，称定重量，超声30~50分钟，放冷，用体积份数比为25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5~10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明二十九味能消散或其制剂中羟基红花黄色素A（C27H30O15）含量不得少于0.20mg/g。