[发明专利]DNA甲基化的检测探针、检测方法及检测试剂盒无效
| 申请号： | 201210288700.6 | 申请日： | 2012-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN103589777A | 公开（公告）日： | 2014-02-19 |
| 发明（设计）人： | 张春阳;曹岸萍 | 申请（专利权）人： | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 吴平 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种DNA甲基化检测探针、检测方法及检测试剂盒。该检测探针包括能与甲基化DNA互补的3’端和5’端以及中间部分的用于引发HRCA反应的特异性序列。若待测DNA为甲基化DNA，则其能与检测探针完全互补配对，在后续DNA连接酶的作用下，检测探针的3’端和5’端连接形成环状DNA；而非甲基化的DNA不能与检测探针完全互补配对，没有环状DNA的形成。环状DNA可以通过后续的HRCA反应及信号检测定量分析待测DNA的甲基化程度，由于HRCA具有109倍信号放大能力，从而保证了检测的超高灵敏度要求。且使用该探针，检测过程中不需要使用昂贵的荧光标记的探针或进行PCR扩增，检测的成本大大降低。此外，该检测方法对甲基化DNA没有酶切位点的要求，说明该方法有广泛应用性。 | ||
| 搜索关键词： | dna 甲基化 检测 探针 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种DNA甲基化检测探针，其特征在于，包括5’端和3’端的用于与甲基化DNA互补配对的序列以及中间部分的用于引发超分支滚环扩增反应的特异性序列，其中，检测探针3’端的最后一个碱基为鸟嘌呤，所述鸟嘌呤与甲基化DNA中部的甲基化胞嘧啶配对，且检测探针3’端的序列与甲基化DNA的自中部所述甲基化胞嘧啶至3’端的序列反向互补配对，检测探针5’端的序列与甲基化DNA的自中部所述甲基化胞嘧啶的临近脱氧核苷酸至5’端的序列反向互补配对。
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