[发明专利]PCR-焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物、试剂盒和检测方法有效
申请号: | 201210291128.9 | 申请日: | 2012-08-15 |
公开(公告)号: | CN102827931A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 许龙岩;袁慕云;凌莉;阳静;唐勤;陈碧玲;易敏英 | 申请(专利权)人: | 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 刘明星 |
地址: | 510623 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种PCR-焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物、试剂盒和检测方法。本发明根据单增李斯特菌hly基因设计扩增引物和测序引物,建立了PCR-焦磷酸测序,从DNA碱基序列水平上检测单增李斯特菌的方法。本发明先对目标片段进行PCR扩增,保证扩增片段的特异性,再用扩增产物制备单链模板,在测序引物的引导下进行焦磷酸测序。检测的所得碱基序列,用NCBI网站的BLAST功能反复比对时发现,单增李斯特菌hly基因测序引物后的碱基序列具有良好的特异性,测序引物后21个DNA碱基序列为ATCCAGGTGC TCTCGTAAAA G时就可鉴定为单增李斯特菌。 | ||
搜索关键词: | pcr 磷酸 检测 李斯特 引物 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
一种PCR‑焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物,其特征在于,包括PCR引物和测序引物:PCR引物:上游引物F:AGTATACCACGGAGATGCAGTGA; 下游引物R:GGCAAATCAATGCTGAGTGTT;测序引物S:AATTTCGAGCCTAACCT。
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