[发明专利]PCR-焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物、试剂盒和检测方法有效

专利信息
申请号: 201210291128.9 申请日: 2012-08-15
公开(公告)号: CN102827931A 公开(公告)日: 2012-12-19
发明(设计)人: 许龙岩;袁慕云;凌莉;阳静;唐勤;陈碧玲;易敏英 申请(专利权)人: 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 代理人: 刘明星
地址: 510623 广东省广州*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种PCR-焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物、试剂盒和检测方法。本发明根据单增李斯特菌hly基因设计扩增引物和测序引物,建立了PCR-焦磷酸测序,从DNA碱基序列水平上检测单增李斯特菌的方法。本发明先对目标片段进行PCR扩增,保证扩增片段的特异性,再用扩增产物制备单链模板,在测序引物的引导下进行焦磷酸测序。检测的所得碱基序列,用NCBI网站的BLAST功能反复比对时发现,单增李斯特菌hly基因测序引物后的碱基序列具有良好的特异性,测序引物后21个DNA碱基序列为ATCCAGGTGC TCTCGTAAAA G时就可鉴定为单增李斯特菌。
搜索关键词: pcr 磷酸 检测 李斯特 引物 试剂盒 方法
【主权项】:
一种PCR‑焦磷酸法检测单增李斯特菌的检测引物,其特征在于,包括PCR引物和测序引物:PCR引物:上游引物F:AGTATACCACGGAGATGCAGTGA;         下游引物R:GGCAAATCAATGCTGAGTGTT;测序引物S:AATTTCGAGCCTAACCT。
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