[发明专利]基于Taqman-ARMS技术检测基因突变分型的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及分子生物学领域，公开了基于Taqman-ARMS技术检测基因突变分型的方法；该方法结合了ARMS突变富集和Taqman-MGB特异性荧光检测两种技术，利用ARMS引物对突变靶序列进行特异性PCR扩增，Taqman-MGB探针对扩增产物进行特异性位点检测，在Real-timePCR基础上鉴定特定突变，此种方法与直接测序、芯片检测等突变检测技术比较，本发明用于检测基因突变具有特异性强、灵敏度高、操作简单快速、通量高等优势。

主权项

基于Taqman‑ARMS技术检测基因突变分型的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）根据目的基因的突变位点设计ARMS引物，所述ARMS引物的上游引物或下游引物的3’末端为突变位点，并将位于突变位点上游第1‑3位核苷酸中的任一位错义突变；（2）根据所述突变位点设计Taqman‑MGB探针，所述Taqman‑MGB探针特异识别ARMS引物的扩增产物正义链突变位点的Taqman探针，所述探针的3’端结合有小沟结合分子；（3）提取模版DNA，利用步骤（1）所得引物对和步骤（2）所得探针对模板DNA进行荧光定量PCR检测。