[发明专利]一种原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性其构建方法及其应用无效
| 申请号： | 201210299748.7 | 申请日： | 2012-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN102796820A | 公开（公告）日： | 2012-11-28 |
| 发明（设计）人： | 黄曙;季国忠;杨昀;范志宁;王敏;汤小伟 | 申请（专利权）人： | 黄曙;南京医科大学第二附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人： | 卢霞 |
| 地址： | 210029 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种与原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性、其构建方法及其应用。本发明具有如下技术效果：1）本发明所建立的方法可以简便快捷地检测位于人klotho基因外显子4区的单核苷酸多态性，诊断个体是否对原发性肝细胞肝癌具有易感性，从而有利于原发性肝细胞肝癌易感人群的筛查和原发性肝细胞肝癌的预防；2）利用rs648202的T等位位点作为药物设计靶点进行药物的筛选，筛选出能够调节klotho基因表达水平的活性分子，促进新的抗肿瘤药物的发现；3）利用本发明提供的引物序列和HaeIII核酸内切酶可以简便、高效、特异地检测出rs648202多态；4）利用原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性，构建对原发性肝细胞肝癌进行遗传性诊断的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 原发性 肝细胞 肝癌 相关 klotho 基因 核苷酸 多态性 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种检测原发性肝细胞性肝癌相关的klotho基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，采用PCR‑RFLP方法，包括以下步骤：⑴以包含klotho基因的待测人全基因组DNA为模板，PCR扩增得到klotho基因外显子4区的包含rs648202单核苷酸多态的DNA序列，即SEQ ID No.1中第2190位至第2352位所示序列；其中，PCR引物序列如下：上游引物为F: 5'‑ ATAGCCTTGCAGGCTGATTG ‑3' 下游引物为R: 5'‑ TTCTTTGGTTCAGCCAGTCC ‑3'⑵ 对PCR扩增产物经限制性内切酶Hae III进行酶切后通过琼脂糖凝胶电泳进行rs648202单核苷酸多态分型。
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