[发明专利]适用于Vero细胞微载体悬浮放大培养的培养基及方法

摘要

本发明公开了一种造用于Vero细胞微载体悬浮放大培养的培养基，包括氨基酸，无机盐，维生素，蛋白水解物，脂类，缓冲成分和添加物。通过上述方式，本发明能够不仅适合在添加痕量血清情况下Vero方瓶静置培养和滚瓶培养，也支持微载体悬浮培养和反应器微载体放大培养，还可以作为无血清病毒维持液实现无血清病毒生产。

主权项

1.Vero微载体悬浮规模放大培养的低成本培养基的应用，其特征在于：所述低成本培养基包括21种氨基酸、11种无机盐、12种维生素、1种蛋白水解物、2种脂类、2种缓冲成分、7种添加物；所述低成本培养基的成分如下：所述50×主要盐类：所述10000×次要盐类：所述200×维生素和其它为：所述10×氨基酸为：所述应用步骤为：将Vero细胞以0.3×106细胞数/毫升密度接种于5升搅拌式生物反应器中，在5升反应器中微载体悬浮培养Vero细胞，培养至72小时，微载体上的细胞用胰蛋白酶消化，补加新微载体，将消化下来的细胞和微载体混匀后打入25升生物反应器内培养，工作体积为18升；25升反应器反应器参数设置：温度为37℃、pH值为7.2、溶氧为40％饱和空气、搅拌速度为35转/分钟，经过一次消化放大操作，Vero细胞在5升反应器中生长正常，培养96小时细胞仍然形成致密单层，培养144小时细胞密度达到6.5×106细胞数/毫升。