[发明专利]一种富集养殖家畜尿样中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的方法

摘要

本发明公开了一种富集养殖家畜尿样中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的方法。本发明涉及分析化学领域特别是样品前处理的方法。本发明先通过样品预处理，再加入表面修饰有磺酸基的聚苯乙烯超顺磁纳米或亚微米磁球吸附，洗脱，收集洗脱液。洗脱溶液可直接用于液相色谱-质谱联用定量分析克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的含量。本发明方法具有操作流程简单、提取回收率高、洗脱溶剂用量少、无需旋蒸的特点。

主权项

一种富集养殖家畜尿样中克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的方法，其特征在于包含以下步骤：（1）样品处理：取尿样5~10 mL，调节尿样pH至5~7；（2）吸附：加入适量磺酸基修饰的聚苯乙烯磁球，混匀，充分吸附，磁场分离磁球，弃去上清； （3）洗脱收集：加200‑800 µL洗脱溶剂将磁球上的克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇洗脱，分离磁球，收集洗脱液；其中洗脱溶剂为含5%氨水的甲醇或乙醇溶液;步骤（2）中聚苯乙烯超顺磁磁球表面修饰有磺酸基功能团，磺酸基修饰磁球粒径为70~300 nm；所述粒径为70~300 nm，磺酸基修饰的聚苯乙烯磁球按照如下步骤制备：化学共沉淀法合成超顺磁性Fe₃O₄纳米单颗粒，再将Fe₃O₄纳米颗粒表面油酸化，无水乙醇洗涤后氮气吹干；取5 g表面油酸化的Fe₃O₄纳米颗粒，用体积比15:1的苯乙烯‑十六烷混合液5 mL悬浮Fe₃O₄纳米颗粒，超声5~10 min形成磁流体，将磁流体转入400 mL，0.01M含0.2~0.5%的SDS的NaHCO₃溶液中，超声波频率为25KHz ，超声功率为200‑300 W条件下继续超声乳化30min，形成细乳液；加0.1g K₂S₂O₈于70℃反应20~40 min后加入0.5 g乙烯基磺酸钠，继续反应12 h；磁架吸附磁球，即获得内含超顺磁性Fe₃O₄纳米单颗粒，表面修饰有磺酸基的磁球，磁球粒径大小与溶液中SDS含量以及超声功率成反比；磁架回收磁球，制备好的磺酸化磁球依次采用饱和食盐水、3% NaOH 以及3% HCl 浸泡洗涤各1~3 h，最后以0.01 mol/L pH 7.0磷酸盐缓冲液洗涤磁球至中性，并将磁球重悬于0.01 mol/L pH 7.0磷酸盐缓冲液中于4 ℃保存备用。