[发明专利]一种海水中重金属镉污染的生物学灵敏检测方法

摘要

本发明公开了一种高效、简捷、灵敏检测海水中重金属镉的生物学方法。具体是将青蛤分别置于含有重金属镉（Cd2+）和不含镉（Cd2+）的海水中，在96h后解剖获取青蛤肝脏组织，提取其总RNA并反转录为cDNA，根据设计的特异性引物，利用实时荧光定量PCR方法测定实验组青蛤HSP70（热休克蛋白70）基因的表达量与对照组的差别，水体中的重金属镉（Cd2+）含量越高则热休克蛋白基因的相对表达量越大，并且可以观察到分析仪器难以检测出的水体中低浓度镉（Cd2+）。本发明能够作为一种常规生物技术监测海水中重金属镉的污染程度及不同水域间的差异，它具有分析灵敏度高、对比性强等特点，可以评价重金属镉（Cd2+）对水域及生物体的有害风险，避免势态严重而造成不可挽回的损失。

主权项

一种用于监测海水中重金属镉污染的热休克蛋白HSP‑70实时荧光定量PCR反应的特异性引物，其特征在于：上游引物为：HSP‑70‑RT‑F：5'‑CTGCTTACTTCAACGACTCCC‑3'；下游引物为：HSP‑70‑RT‑R：5'‑CTTTTTGTCAAGACCATAGGC‑3'；作为内参基因的青蛤β‑actin基因特异性上下游引物为：β‑actin‑S：5'‑CACCACAACTGCCGAGAG‑3'；β‑actin‑A：5'‑CCGATAGTGATGACCTGACC‑3'。