[发明专利]表达巢蛋白的肾源干细胞或祖细胞无效
| 申请号： | 201210331539.6 | 申请日： | 2012-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN102864124A | 公开（公告）日： | 2013-01-09 |
| 发明（设计）人： | 项鹏;姜美花 | 申请（专利权）人： | 广东江源生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;A61K35/23;A61P13/12 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人： | 刘宇峰 |
| 地址： | 510623 广东省广州市天*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种表达巢蛋白的肾源干细胞或祖细胞、分离该细胞的方法，以及该细胞的用途。本发明所述的方法包括：提供一种以C57BL/6为遗传背景的巢蛋白-绿色荧光蛋白转基因小鼠模型；饲养小鼠至1周龄或以上，分离肾，用胶原酶IV和胰蛋白酶消化，过滤消化后的细胞悬液，筛除肾结缔组织、肾小管和细胞团块，获得单个细胞；通过流式细胞仪进行分选，收集表达绿色荧光蛋白的荧光强度是阴性对照细胞的荧光强度的10倍或以上的细胞，从而分离出所述表达巢蛋白的肾源干细胞或祖细胞。本发明提供了根据上述方法分离的肾源干/祖细胞，以及进一步在培养基中培养获得的自我更新和增殖的细胞，并且提供了将这些细胞用于制备治疗肾损伤修复的组合物的用途。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 蛋白 干细胞 细胞 | ||
【主权项】：
一种分离肾源干细胞或祖细胞的方法，其中所述细胞表达巢蛋白，所述方法包括：提供一种以C57BL/6为遗传背景的巢蛋白‑绿色荧光蛋白转基因小鼠模型；饲养所述转基因小鼠模型的小鼠至1周龄或以上，分离小鼠肾，用胶原酶IV和胰蛋白酶消化，过滤消化后的细胞悬液，筛除肾结缔组织、肾小管和细胞团块，获得单个细胞，所述细胞产生受巢蛋白增强子控制的增强型绿色荧光蛋白；将上述单个细胞通过流式细胞仪进行分选，用C57B/6小鼠细胞做阴性对照细胞，收集表达绿色荧光蛋白的荧光强度是阴性对照细胞的荧光强度的10倍或以上的细胞，从而分离出所述表达巢蛋白的肾源干细胞或祖细胞。
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