[发明专利]胞内劳森氏菌环介导等温扩增检测方法及其试剂盒无效
| 申请号： | 201210338260.0 | 申请日： | 2012-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN102839217A | 公开（公告）日： | 2012-12-26 |
| 发明（设计）人： | 黄翠琴;杨小燕;郑新添;尹会方 | 申请（专利权）人： | 龙岩学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 福建省龙*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种胞内劳森氏菌环介导等温扩增检测方法及其试剂盒。本发明试剂盒含有环介导等温扩增（LAMP）反应液、BstDNA聚合酶和SYBRGreenI荧光染料显色剂。利用试剂盒通过对样品中DNA的提取、胞内劳森氏菌环介导等温扩增和显色检测三个环节，从而检测出胞内劳森氏菌。通过灵敏性试验证明，本方法可对95.6pg•μL-1的DNA模板进行高效扩增，显示出本方法高度的灵敏性。解决了现有技术中检测步骤繁琐、成本较高、不适于临场检测的问题，提供了一种使用仪器简单、成本低、检测快速、敏感，适于基层现场检测胞内劳森氏菌的方法及其试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 胞内劳森氏菌环介导 等温 扩增 检测 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种胞内劳森氏菌环介导等温扩增快速检测试剂盒，其特征在于包括以下成分：（1）环介导等温扩增（LAMP）反应液：包括0.2 μM 的上游外引物、0.2 μM的下游外引物、1.6 μM的上游内引物、1.6 μM的下游内引物、1 M甜菜碱、6 mM硫酸镁、1.6mM dNTP、10×Thermopol反应缓冲液，其中引物序列为：上游外引物F3：5'‑AGCTAACGCGTTAAGCACC‑3'下游外引物B3：5'‑CTTAACCCAACACCTCACGG‑3'上游内引物FIP：5'‑CCACGTACTCCACCGCTTGTGTACGGTCGCAAGGCTGAA‑3'下游内引BIP： 5'‑ACCCAGGCTTACATCTGAGGGAATGCAGCACCTGTCTTGAG‑3'（2）聚合酶：每微升为8个活性单位的Bst DNA聚合酶；（3）显色剂：SYBR Green I 荧光染料。
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