[发明专利]基于基因组简化与二代测序DNA文库构建方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201210358999.8 | 申请日： | 2012-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN102877136A | 公开（公告）日： | 2013-01-16 |
| 发明（设计）人： | 潘玉春;陈强;杨玉梅;王起山;张向喆;马育芳;陈振亮;廖荣荣;涂盈盈;颉孝贤;王振;贺鹏飞;张哲 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王毓理 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种生物技术领域的基于基因组简化与二代测序DNA文库构建方法及试剂盒，该方法和试剂盒针对现有文库构建方法不足，可用于参考基因组不完善、研究群体系谱不清晰、无单体型图物种的全基因组SNP检测及基因分型。本发明涉及的DNA文库构建方法及试剂盒操作流程简单，产生的文库测序质量较高，个体间片段分布变异性小，研究成本低，在实现高通量全基因组SNP检测及基因分型研究中具有非常广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 基因组 简化 二代 dna 文库 构建 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种基于基因组简化与二代测序DNA文库构建方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步、基因组DNA的提取：利用组织DNA提取试剂盒提取基因组DNA，利用限制性内切酶对基因组DNA进行消化处理，得到限制性片段；第二步、使用T4DNA连接酶对限制性片段连接上DNA条形码‑接头(DNA Barcode Adapter)，得到DNA条形码‑接头的序列对；第三步、将DNA条形码‑接头的序列对进行混合，然后以混合物作为模板进行PCR扩增，扩增后的产物经琼脂糖凝胶电泳后回收DNA片段作为测序文库，采用芯片分析系统进行最终的质量检测和测序。
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