[发明专利]一种高效表达枯草芽孢杆菌L-天冬酰胺酶的方法无效
申请号: | 201210360554.3 | 申请日: | 2012-09-20 |
公开(公告)号: | CN102864163A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 饶志明;贾明媚;徐美娟 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N15/75 | 分类号: | C12N15/75;C12N1/21;C12N9/82;C12Q1/34;C12R1/125 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种高效表达枯草芽孢杆菌L-天冬酰胺酶的方法,属于酶基因工程和酶工程领域。本发明通过PCR技术以B.subtilis 6-7总DNA为模板,扩增获得L-天冬酰胺酶编码基因ansZ,将其连接到表达载体pMA5上,以B.subtilis168为表达宿主,构建L-天冬酰胺酶基因工程菌pMA5-ansZ/B.subtilis168,实现L-天冬酰胺酶的高效表达,该工程菌的酶活为22.4U/mL,较出发菌株提高574倍。 | ||
搜索关键词: | 一种 高效 表达 枯草 芽孢 杆菌 天冬 酰胺酶 方法 | ||
【主权项】:
一种重组表达载体pMA5‑ansZ,其特征是:通过PCR技术获得来源于B.subtilis 6‑7的ansZ基因,与克隆载体pMD18‑T相连,获得该基因的大量克隆,经双酶切,片段纯化后与表达载体pMA5连接,获得重组质粒pMA5‑ansZ。
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