[发明专利]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗重组蛋白抗原HI2的纯化方法有效
申请号: | 201210375859.1 | 申请日: | 2012-09-29 |
公开(公告)号: | CN103044531A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
发明(设计)人: | 郭鹰;邹全明;曾浩;董衍东;樊绍文;卢陆;鲁东水;章金勇;敬海明 | 申请(专利权)人: | 重庆原伦生物科技有限公司;中国人民解放军第三军医大学 |
主分类号: | C07K14/31 | 分类号: | C07K14/31;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/16;C12N15/31;C12N15/63 |
代理公司: | 重庆志合专利事务所 50210 | 代理人: | 胡荣珲 |
地址: | 401121 重庆市北部新*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明公开了一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗重组蛋白抗原HI2的纯化方法。HI2蛋白为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Hla和IsdB两个抗原分子的活性功能片段重组融合、大肠杆菌基因工程菌表达获得。采用对基因工程菌进行高压破菌、盐析、GST亲和层析、PP酶切、MMC层析、凝胶过滤层析等技术,获得高纯度的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)重组双亚单位基因工程蛋白HI2。该发明纯化工艺简捷、容易放大、重复性好,所获目标蛋白纯度高,动物试验证明可有效刺激机体产生较高的体液免疫应答和良好的免疫保护作用。 | ||
搜索关键词: | 耐甲氧 西林 金黄色 葡萄球菌 mrsa 疫苗 重组 蛋白 抗原 hi sub 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗重组蛋白抗原HI2的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:A)收集自构建表达抗原HI2的大肠杆菌工程菌高密度发酵的菌体;B)采用高压破菌、离心,硫酸铵分步沉淀,GST亲和层析、PP酶切,MMC层析、凝胶过滤层析技术的顺序组合对制备的HI2进行纯化。
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