[发明专利]一种纯化恩夫韦肽的方法无效
| 申请号： | 201210375897.7 | 申请日： | 2012-10-08 |
| 公开（公告）号： | CN102827258A | 公开（公告）日： | 2012-12-19 |
| 发明（设计）人： | 徐红岩;任丽萍 | 申请（专利权）人： | 吉尔生化（上海）有限公司;上海吉尔多肽有限公司;滨海吉尔多肽有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C07K1/20;C07K1/16 |
| 代理公司： | 上海浦东良风专利代理有限责任公司 31113 | 代理人： | 张劲风 |
| 地址： | 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用反相高效液相色谱法纯化恩夫韦肽的方法，主要解决恩夫韦肽收率极低的技术问题。纯化包括如下步骤：1）将恩夫韦肽粗品以稀氨水完全溶解后，以滤膜过滤后待用，以固定相为聚苯乙烯-聚乙烯基苯为基质的聚合物树脂填料的聚合物色谱柱，流动相中，磷酸盐缓冲液为A相，色谱乙腈为B相，进行梯度洗脱纯化，收集目的峰值含量大于80%的肽溶液；2）以固定相为十八烷基键合硅胶的反相硅胶柱进行二次纯化同时转盐，流动相中，醋酸水溶液为A相，色谱乙腈为B相，收集目的峰值含量大于98%的肽溶液；3）将最终的高纯度肽溶液减压旋蒸浓缩冷冻干燥，得粉末状成品肽。本发明提出了一条适合放大生产的高效液相色谱法纯化恩夫韦肽的纯化工艺。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 纯化 恩夫韦肽 方法 | ||
【主权项】：
一种纯化恩夫韦肽的方法，其特征是包括如下步骤：1）将恩夫韦肽粗品以稀氨水完全溶解后，以滤膜过滤后待用，以固定相为聚合物色谱柱，流动相为两相，磷酸盐缓冲液为A相，色谱乙腈为B相，进行梯度洗脱纯化，收集目的峰值含量大于80%的肽溶液；2) 以固定相为反相硅胶色谱柱进行二次纯化同时转盐，流动相为两相，醋酸水溶液为A相，色谱乙腈为B相，收集目的峰值含量大于98%的肽溶液；3）将最终的高纯度肽溶液减压旋蒸浓缩冷冻干燥，得粉末状成品肽。
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