[发明专利]一种重组牛朊蛋白bPrP及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201210376186.1 申请日: 2012-09-29
公开(公告)号: CN102875662A 公开(公告)日: 2013-01-16
发明(设计)人: 杨利峰;赵德明;杨秀进;王伊琴;宋志琦;周向梅;尹晓敏;赵化粉 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C07K14/47 分类号: C07K14/47;C07K1/16;C12N15/12;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/66;G01N33/68
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王朋飞;张庆敏
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供了一种重组牛朊蛋白bPrP及其制备方法和应用,bPrP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明以牛全血基因为模板,以SEQ IDNo3、4所示核苷酸序列为引物通过PCR方法获得带有酶切位点的牛朊蛋白DNA序列,将其连接到pPROEX-htb质粒上,通过定点突变技术除去表达载体中目的基因之前的多余酶切位点,获得bPrP全真表达载体。将该载体在大肠杆菌中表达,过高亲和力层析柱纯化、复性,得到了和天然prion蛋白具有相同构象的重组朊蛋白。本发明所得到的牛朊蛋白氨基酸序列与天然牛朊蛋白高度相似(仅N端多了一个甘氨酸),可用于开发牛朊蛋白单克隆抗体、对牛的朊病毒病诊断试剂盒用。
搜索关键词: 一种 重组 蛋白 bprp 及其 制备 方法 应用
【主权项】:
一种重组牛朊蛋白bPrP其氨基酸序列为:a)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列;或b)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经替换、缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基形成的具有同等功能的氨基酸序列。
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