[发明专利]一种抗人源多药耐药蛋白Fab抗体及其制备方法有效
| 申请号： | 201210379252.0 | 申请日： | 2012-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN103044547B | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 张学梅;张海玉;王清;李俊 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00 |
| 代理公司： | 大连智慧专利事务所 21215 | 代理人： | 周志舰 |
| 地址： | 116622 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种抗人源多药耐药蛋白Fab抗体及其制备方法，属于抗体及其制备领域；本发明为取多药耐药性大肠癌病理组织总RNA并逆转录为cDNA，利用本实验室设计的特异性引物扩增出P‑gp跨膜区（氨基酸784～968）基因片段，克隆至pET28a（+）载体并转化E.coli BL21（DE3），IPTG，30℃诱导表达，表达产物经镍离子亲和层析柱纯化后Western Blot鉴定。将纯化的P‑gp784‑968蛋白作为抗原，对利用17条重链上游引物和5条重链下游引物；20条轻链上游引物及2条轻链下游引物，用原核表达的P‑gp784‑968肽段对 pComb3载体的P‑gp Fab抗体库进行五轮淘选，最终淘选所获得的克隆进行双酶切鉴定及IPTG诱导表达，表达产物通过ELISA及Western Blot鉴定后获得阳性克隆菌株，并测序，得PFab29。本发明为制备抑制肿瘤多药耐药的药物提供可能。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗人源多药 耐药 蛋白 fab 抗体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种抗人源多药耐药蛋白Fab抗体，其特征在于：轻链基因的序列如SEQ ID No.1所示，重链基因的序列如SEQ ID No.3所示。
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