[发明专利]一种R-3-奎宁环醇光学纯度的测定方法

摘要

技术领域：本发明涉及一种R-3-奎宁环醇光学纯度的测定方法。通过(R/S)-3-奎宁环醇的衍生化反应，使(R/S)-3-奎宁环醇有了紫外光吸收，增强了其手性中心对手性色谱柱填料的辨识能力，使(R/S)-3-奎宁醇的一对对映异构体(R)-3-奎宁环醇、(S)-奎宁环醇在DAICELAD-H色谱柱上完美分离，分离度≥4.0。首次创新性的建立了柱前衍生-手性色谱法测定(R)-3-奎宁醇的光学纯度的方法，为(R)-3-奎宁醇光学纯度的准确检测提供了保障。

主权项

1.一种R-3-奎宁环醇光学纯度的测定方法，其特征在于，第一步：样品的制备：(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯的制备：向反应瓶中加入20ml二氯甲烷，1.0g3-奎宁环醇，水浴控温20-30℃，向反应瓶中加入0.47g氢化钠，控温20-30℃，向体系中滴入2.22g苯甲酰氯，20-30℃保温反应，直到TLC跟踪原料反应完全；后处理过程：冰水浴条件下，向体系中滴加1mol/L的盐酸溶液，直至体系不放气为止，分出二氯甲烷相，水相用20ml二氯甲烷萃取一次，合并有机相。有机相用10ml饱和食盐水洗涤一次，减压浓缩干后得(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯；(R)-3-苯甲酸奎宁环酯对照品的制备：向反应瓶中加入20ml二氯甲烷，接着加入1.0g(R)-3-奎宁环醇对照品，水浴控温20-30℃，向反应瓶中加入0.47g氢化钠，控温20-30℃，向体系中滴入2.22g苯甲酰氯，20-30℃保温反应，直到TLC跟踪原料反应完全；后处理过程：冰水浴条件下，向体系中滴加1mol/L的盐酸溶液，直至体系不放气为止，分出二氯甲烷相，水相用20ml二氯甲烷萃取一次，合并有机相。有机相用10ml饱和食盐水洗涤一次，减压浓缩干后得(R)-3-苯甲酸奎宁环酯；(R)-3-苯甲酸奎宁环酯的制备：向反应瓶中加入20ml二氯甲烷，接着加入1.0g(R)-3-奎宁环醇，水浴控温20-30℃，向反应瓶中加入0.47g氢化钠，控温20-30℃，向体系中滴入2.22g苯甲酰氯，20-30℃保温反应，直到TLC跟踪原料反应完全；后处理过程：冰水浴条件下，向体系中滴加1mol/L的盐酸溶液，直至体系不放气为止，分出二氯甲烷相，水相用20ml二氯甲烷萃取一次，合并有机相。有机相用10ml饱和食盐水洗涤一次，减压浓缩干后得(R)-3-苯甲酸奎宁环酯样品；式2第二步 供试品溶液制备：准确称取(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯消旋体、(R)-3-苯甲酸奎宁环酯、(R)-3-苯甲酸奎宁环酯样品适量，加乙醇溶解后分别制备为0.2mg/ml的溶液，作为供试品溶液；第三步 色谱条件准备及检测：(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯纯度测定液相色谱条件：色谱系统为高效液相色谱仪，色谱柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈∶缓冲盐(20mM乙酸铵，氨水调节PH＝7.51)＝30∶70，流速＝1.0ml/min，柱温：35℃，检测波长为232nm，进样量20μ1，面积归一化法计算纯度；(R)-3-苯甲酸奎宁环酯样品光学纯度测定；色谱系统为高效液相色谱仪，色谱柱填料为直链淀粉-三(3，5-二甲苯基氨基甲酸酯)即AD-H手性色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为正己烷∶乙醇∶二乙胺＝80∶20∶0.1，配制后经0.45μm有机滤膜过滤，超声脱气；流速1.0ml/min，检测波长为232nm，进样量为为10μl，首先对(RS)-3-苯甲酸奎宁环酯消旋体、(R)-3-苯甲酸奎宁环酯分别进样分析，进行系统适应性试验，然后进行(R)-3-苯甲酸奎宁环酯样品光学纯度测定，面积归一化法计算样品光学纯度。