[发明专利]阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[Cn-s-Cnim]Br2在基因转染中的应用有效

专利信息
申请号: 201210404508.9 申请日: 2012-10-22
公开(公告)号: CN102943086A 公开(公告)日: 2013-02-27
发明(设计)人: 徐桂英;周亭;杨延莲;敖明祺;李平;王琛 申请(专利权)人: 山东大学
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63
代理公司: 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 代理人: 王绪银
地址: 250100 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明涉及一种阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[Cn-s-Cnim]Br2在基因转染中的应用。本发明中非病毒基因载体为阳离子型咪唑Gemini表面活性剂([C12-4-C12im]Br2),缓冲液配制的[C12-4-C12im]Br2溶液可直接应用于基因转染。本发明还提供了[C12-4-C12im]Br2有效诱导DNA凝聚形成[C12-4-C12im]Br2/DNA纳米复合物的方法;向受体细胞添加[C12-4-C12im]Br2/DNA的纳米复合物的缓冲液溶液,可以实现基因在细胞内的高效率转染。本发明中[Cn-s-Cnim]Br2及[C12-4-C12im]Br2/DNA纳米复合物对不同的细胞均具有较高的基因转染效率,且对于转染细胞的细胞毒性较低。
搜索关键词: 阳离子 咪唑 gemini 表面活性剂 cn cnim br sub 基因 转染 中的 应用
【主权项】:
一种阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[Cn‑s‑Cnim]Br2在基因转染中的应用,所述阳离子型咪唑Gemini表面活性剂,通式为[Cn‑s‑Cnim]Br2,n=10,12,14;s=2,4,6,作为非病毒基因载体直接应用于基因转染时,先将[Cn‑s‑Cnim]Br2溶解于pH 6.8‑7.5的磷酸盐缓冲液或Tris‑HCl缓冲液中,取100μL加入到培养的细胞中,孵育24小时,利用酶标仪测试细胞样品的吸光度值来测试细胞的存活率,通过细胞存活率判定[Cn‑s‑Cnim]Br2细胞毒性;所述的细胞包括人胚肾细胞(HEK293细胞)、人宫颈癌细胞(HeLa细胞)、人非小细胞肺癌细胞(A549Y‑10细胞)或人口腔表皮样癌细胞(KB细胞)。
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