[发明专利]一种凝结芽孢杆菌的固体发酵生产方法

摘要

本发明公开了一种凝结芽孢杆菌的固体发酵生产方法，采用凝结芽孢杆菌作为发酵菌种，在优化的固体培养基中，在温度为37~40℃的条件下培养，经过三级放大而进行大规模发酵生产，然后将凝结芽孢杆菌培养物进行菌落计数，活菌体浓度可达9.10×109CFU/g鲜曲，芽孢浓度可达2.45×109CFU/g鲜曲。本发明有益效果：本发明生产工艺简单稳定，活菌体密度高，发酵产物无需分离纯化便可直接使用，易于生产和推广；同时将凝结芽孢杆菌作为饲料添加剂添加到饲料中，能够在动物的盲、结和直肠定植，发酵产生大量抗菌凝固素、乳酸、氨基酸、维生素和多种消化酶，提高饲料品质，促进饲料的消化吸收，降低料肉比。

主权项

一种凝结芽孢杆菌的固体发酵生产方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）菌种活化：将‑80℃保存的菌种在固体种子培养基固体平板上划线，在温度为37~40℃的条件下培养20~24小时，所述菌种为凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）；（2）制备一级种子：将活化的凝结芽孢杆菌，用接种环挑取三到五环接种于200 mL 液体种子培养基中，将三角瓶置于摇床中，在温度为37~40℃和250rpm的条件下，振荡培养20~24小时后，制得一级种子菌；（3）配制固体发酵培养基：将固体干基加入质量比为1:1~2的无菌水，并在pH值为自然条件下，搅拌均匀，将固体培养基在温度为121℃条件下，高温高压灭菌20min，待冷却后即可作为固体发酵培养基使用；（4）固体发酵：将经过灭菌处理的固体发酵培养基按照8~10%的接种量接入一级种子菌，搅拌均匀，保持湿度为50~70%和温度为37~40℃的条件下，培养20~24小时，制得二级种子；（5）将得到的二级种子，按照步骤（4）进一步固体发酵得到三级种子；（6）可以根据具体的培养用量，进一步将三级种子按照步骤（4）进一步固体发酵扩大培养；（7）将凝结芽孢杆菌培养物进行菌落计数，活菌体浓度可达9.10×109 CFU/g 鲜曲，芽孢浓度可达2.45×109 CFU/g 鲜曲。