[发明专利]一种花生籽仁的石蜡切片方法有效
申请号: | 201210408507.1 | 申请日: | 2012-10-24 |
公开(公告)号: | CN102914461A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 单世华;闫彩霞;李春娟;张廷婷;许婷婷 | 申请(专利权)人: | 山东省花生研究所 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266000 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供一种花生籽仁的石蜡切片方法,其包括以下步骤:1)取材;2)5%~10%戊二醛固定;3)脱水:80%乙醇50min,95%乙醇45min,100%乙醇45min,每梯度重复1次;4)透明:体积比1:1二甲苯:100%乙醇20~30min,二甲苯15~25min,二甲苯15~25min;5)直接透蜡法透蜡,包埋,切片;6)脱蜡,复水,苏木素-曙红复染,脱水,透明,封片。本发明能较好的固定花生籽仁细胞组织,切片完整、连续、不存在空洞,切片厚度可达7µm,且操作简单,适用于所有花生品种,便于推广应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 花生 石蜡 切片 方法 | ||
【主权项】:
一种花生籽仁的石蜡切片方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取材;2)固定:采用体积浓度为5%~10%戊二醛固定;3)脱水:80%乙醇50min,95%乙醇45min,100%乙醇45min,每梯度至少2次脱水过程;4)透明:体积比1:1二甲苯:100%乙醇处理20~30min,二甲苯处理15~25min,二甲苯处理15~25min;5)透蜡、包埋和切片:采用熔点为54~56℃的切片石蜡直接透蜡2次,每次1.5~2h,透蜡后包埋、切片;6)脱蜡、染色和封片:脱蜡:二甲苯30~40min,重复1次;复水:100%乙醇2~3min,重复1次;95%乙醇2~3min,重复1次;80%乙醇2~3min,重复1次;50%乙醇2~3min;蒸馏水2~3min;复染:苏木素染液6~8min,蒸馏水冲洗5~7min,曙红染液染色3min15s~4min;脱水:95%乙醇2~3min,重复1次,100%乙醇2~3min,重复1次;透明:二甲苯2~3min,重复3次;封片。
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