[发明专利]用于蛋白分离的多维液相色谱分离系统及分离方法

摘要

提供一种用于蛋白分离的多维液相色谱分离系统及分离方法。用于蛋白分离的多维液相色谱分离系统包括流动相储罐、第一输液装置和第二输液装置、第一进样装置和第二进样装置、分离装置、集存装置、至少两个排液装置和流路切换装置。在实施每一维液相色谱分离时，该集存装置收集需要进行下一步液相色谱分离的目标中间馏分并将其储存在集存器中；在第二维或更多维的液相色谱分离时，通过第二进样装置的进样混合器使来自集存器的全部目标中间馏分与流动相混合，并用该第一输液装置和第二输液装置对其输送的流动相的量进行调节和计量，使得该进样混合液中的洗脱剂浓度低于该目标中间馏分中所有需要在该维分离中保留的目标蛋白的临界迁移洗脱剂浓度。

主权项

一种用于蛋白分离的多维液相色谱分离系统，该多维液相色谱分离系统包括检测装置，其特征在于，所述多维液相色谱分离系统包括流动相储罐、第一输液装置和第二输液装置、第一进样装置和第二进样装置、分离装置、包括至少一个集存器的集存装置、至少两个排液装置以及流路切换装置，其中：1）所述流动相储罐储存用于多维液相色谱分离的流动相；2）所述第一输液装置和第二输液装置彼此独立地从所述流动相储罐取出适用于液相色谱分离的流动相并将该流动相输送至所述多维液相色谱分离系统的流路中，并且可彼此独立地调节和计量流量；在第一维分离时，所述第一输液装置将适用于该第一维分离的流动相输送至第一进样装置；在第二维或更多维分离时，所述第一输液装置将适用于该第二维或更多维分离的流动相输送至所述集存装置，并推动储存于所述至少一个集存器中的中间馏分至所述第二进样装置，与此同时所述第二输液装置从所述流动相储罐取出适用于该第二维或更多维分离的流动相输送至所述第二进样装置；3）所述第一进样装置从系统外引入原样并使其随来自第一输液装置的流动相同时进入所述分离装置；第二进样装置包括进样混合器，该进样混合器使来自所述集存装置中的至少一个集存器的中间馏分和流动相与来自所述第二输液装置的流动相混合从而得到进样混合液，并将该进样混合液送入所述下一维分离装置；4）所述分离装置包括色谱柱切换单元和n根色谱柱，或者包括具有分离模式总数为m的色谱柱，并通过所述色谱柱使进入分离装置的液体分离成不同的馏分，其中所述色谱柱切换阀使进入所述分离装置的液体选择性地流入所述n根色谱柱中的一根色谱柱，n为非负整数，m为所述多维液相色谱分离系统中所用的不同分离模式的个数，并且n与m之间满足下式：m≥n    (1)m=n+qi    (2)其中，i为正整数，qi为具有i种分离模式的色谱柱个数；5）所述集存装置包括p个集存器切换单元，其中p大于或等于1，所述集存器切换单元使进入所述集存装置的液体选择性地流入所述集存装置中的至少一个，该集存器将经每一维分离后得到的不同馏分中需要进行进一步分离的中间馏分收集并储存于至少一个集存装置中；6）所述至少两个排液装置将流路中的液体排出至系统外；7）所述流路切换装置，其由与上述装置相连通的阀门和管路所组成，通过对所述流路切换装置中的阀门进行切换，所述流路切换装置除了形成常规液相色谱分离中的流路外，还形成用于进行多维液相色谱分离的流路；该多维液相色谱分离系统的特征还在于，所述第一输液装置和第二输液装置 对其输送的用于第二维或更多维分离的流动相的量进行调节和计量，从而对用于第二维或更多维分离的所述进样混合液中的洗脱剂浓度进行调节，在进样时，所述进样混合液中的洗脱剂浓度低于该进样混合液所包含的中间馏分中的所有需要在该第二维或更多维分离中得以保留的目标蛋白的临界迁移洗脱剂浓度。