[发明专利]黄曲霉毒素G1胶体金免疫层析检测板制备及检测方法

摘要

本发明是一种可半定量测试饲料中黄曲霉毒素G1的胶体金免疫层析检测板，属于生物及食品安全领域。其特征在于：外壳内包括一条试纸条，试纸条的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，所述检测板以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜上自上而下设置横向质控线（C线）和检测线(T线)，所述检测线包被有黄曲霉毒素G1-牛血清白蛋白偶联物(AFG1-BSA)，质控线包被有兔抗鼠多克隆抗体；所述金标垫横向喷涂有纳米金标记的抗黄曲霉毒素G1单克隆抗体。检测板用于检测黄曲霉毒素G1，具有检测快速、操作简单、灵敏度高的特点。

主权项

黄曲霉毒素G1 胶体金免疫层析检测板，其特征在于：外壳内包括一条试纸条，试纸条的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接；金标垫：用胶体金和黄曲霉毒素G1抗体结合制成金标抗体；结合过程：将50 mL浓度为1 x 10^‑4 g/mL的氯金酸溶液加热到沸腾，然后迅速加入1.5 mL柠檬酸三钠，继续加热搅拌反应15 min得到胶体金溶液，然后将抗体溶液以1：1体积比的比例逐滴加入到胶体金溶液中，边加边搅拌，反应5 min后，即得到金标抗体溶液，将制备好的金标抗体调成 A₅₄₀=1.0 的浓度，均匀分散在玻璃纤维滤膜上，自然干燥后即为金标垫备用；所用检测板为：用划膜仪对硝酸纤维素膜进行检测试剂线性包被，下端横线包被黄曲霉毒素G1抗原AFG1‑BSA，浓度为0.5 mg/mL为检测线，上端横线包被羊抗鼠IgG，浓度为1 mg/mL为控制线，包被检测线和质控线后的硝酸纤维素膜自然干燥后用 0.1 mol/L的BSA的pH 7.4的PBS溶液浸泡30 min进行封闭处理，干燥后备用；将样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫四部分依次相互叠加粘贴于试剂板上，以一定宽度切条后即为黄曲霉毒素G1半定量速测检测板。